Anti-NDUFS3 Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O75489

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NDUFS3-Funktion und -Lokalisierung

• NDUFS3 ist ein 30 kDa Eisen-Schwefel-Protein, das als Kernuntereinheit des mitochondrialen Komplex I (NADH:Ubichinon-Oxidoreduktase) dient.
• Es ist für die katalytische Aktivität von Komplex I unerlässlich, erleichtert den Elektronentransfer von NADH auf Ubichinon und trägt zum Protonentransport über die innere Membran bei. Verwandte Referenzen: PMID:14729820, PMID:30140060
• NDUFS3 spielt eine entscheidende Rolle bei der Assembly und Stabilisierung des Komplex-I-Holoenzyms; Mutationen in diesem Gen verursachen einen mitochondrialen Komplex-I-Mangel (MC1DN8). Verwandte Referenzen: PMID:24028823
• Das Protein wird als Vorläufer mit einer N-terminalen mitochondrialen Zielsequenz synthetisiert, die beim Import in das Mitochondrium abgespalten wird.
• Es lokalisiert an der inneren mitochondrialen Membran, wo es in den Membranarm von Komplex I integriert wird.
• Alternatives Spleißen des NDUFS3-Gens erzeugt mehrere Transkriptvarianten, die möglicherweise die Proteinexpression oder -funktion regulieren.
• Als Teil der Atmungskette wird NDUFS3 ubiquitär exprimiert, ist aber besonders in energieintensiven Geweben reichlich vorhanden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich, der für humanes NDUFS3 (Aa 37-264) gemeinsam ist und in der Maus hochkonserviert ist, was die Ansprüche zur Kreuzreaktivität im Datenblatt unterstützt. Forscher sollten die speziespezifische Reaktivität in ihrem eigenen experimentellen System validieren.
• Für Western Blots verwenden Sie mitochondrienangereicherte Lysate oder Ganzzell-Lysate aus Geweben mit hohem mitochondrialem Gehalt (z. B. Herz, Leber), um die Detektion des ~30 kDa Bands zu verbessern.
• Berücksichtigen Sie bei ELISA-Anwendungen die Verwendung desselben rekombinanten Proteinfragments als Beschichtungsantigen für die quantitative Detektion von NDUFS3-spezifischen Antikörpern.
• Fügen Sie geeignete Kontrollen ein: eine Positivkontrolle wie ein humanes oder murines Gewebelysat, von dem bekannt ist, dass es NDUFS3 exprimiert, und eine Negativkontrolle (z. B. NDUFS3-Knockout oder -depletierte Probe), um die Spezifität zu bestätigen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung und Inkubationsbedingungen empirisch für jede Anwendung, da polyklonale Antikörper Chargen-zu-Batch-Variabilitäten aufweisen können.

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