Anti-NCK1 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16333

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NCK1-Funktion und -Lokalisierung

• NCK1 ist ein SH2/SH3-Adapterprotein, auch bekannt als NCK, nck-1 oder NCKalpha, das vom NCK1-Gen kodiert wird; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Es assoziiert mit tyrosinphosphorylierten Wachstumsfaktorrezeptoren (z. B. KDR, PDGFRB) und deren Substraten und verknüpft die Rezeptoraktivierung mit downstreamen Signalkaskaden.
• NCK1 hält den Phosphorylierungsgrad von EIF2S1 niedrig, indem es dessen Dephosphorylierung durch Proteinphosphatase 1 (PP1) fördert, und reguliert so den Translationsstart.
• Es nimmt an der DNA-Schadensantwort teil und erleichtert die effiziente Aktivierung von downstreamen Effektoren wie CHEK2, downstream der ATM/ATR-Schadenssensoren.
• Das Protein moduliert die EIF2AK2/PKR-Aktivierung durch doppelsträngige RNA und beeinflusst die integrierte Stressantwort.
• NCK1 interagiert mit Ephrin-Rezeptoren und trägt möglicherweise zu Zelladhäsions- und Migrationsprozessen bei.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Zytoplasma, das endoplasmatische Retikulum und den Zellkern, was seinen Rollen in der Signaltransduktion und Genexpression entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Interaktionen und Funktionen modulieren können; das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ~43 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus den Aminosäuren 200-300 von humanem NCK1; erwägen Sie die Verwendung einer Positivkontrolle, die das全长-NCK1-Protein exprimiert, zur Validierung.
• Für Western Blots detektieren Sie eine Bande bei ca. 43 kDa in Lysaten von humanen, murinen oder rattigen Zelllinien; validieren Sie die Spezifität durch Peptidblockierung oder Knockdown/Knockout-Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin-eingebettete Schnitte) kann eine Antigen-Retrieval notwendig sein; optimieren Sie die Färbebedingungen für jeden Gewebetyp.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die Epitop-Zugänglichkeit und die zelluläre Architektur zu erhalten.
• ELISA-Anwendungen können von der Kombination mit einem geeigneten Detektionsantikörper profitieren; erwägen Sie Schachbrett-Titrationen für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.

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