Anti-NCF4/p40-phox Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q15080

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NCF4/p40-phox Funktion und Lokalisierung

• NCF4 (Neutrophil cytosol factor 4), auch bekannt als p40-phox, SH3PXD4 oder NCF, ist ein 39032 Da Protein, das vom NCF4-Gen auf dem menschlichen Chromosom 22 kodiert wird. Es wird vorwiegend in hämatopoetischen Zellen exprimiert.
• p40-phox ist eine regulatorische Untereinheit des Phagozyten-NADPH-Oxidase-Komplexes, der Superoxid-Anionen (O2(-)) erzeugt, indem er Elektronen von zytosolischem NADPH auf molekularen Sauerstoff überträgt, was für die Abtötung von Mikroben in Phagozyten entscheidend ist.
• Die Aktivierung der NADPH-Oxidase beinhaltet die Zusammenlagerung von zytosolischen Untereinheiten (einschließlich p40-phox, p47-phox, p67-phox) mit dem membrangebundenen Flavocytochrom b558 (gp91-phox und p22-phox) nach Zellstimulation.
• p40-phox enthält eine N-terminale PX-Domäne, die an Phosphatidylinositol-3-phosphat bindet, und eine C-terminale SH3-Domäne, die Protein-Lipid- und Protein-Protein-Interaktionen vermittelt, die für die Oxidase-Aktivierung und Membranzielrichtung essentiell sind.
• Subzellulär befindet sich p40-phox im Zytosol ruhender Zellen und wandert während der Aktivierung zu Endosomen- und Phagosomenmembranen, was die lokalisierte ROS-Produktion erleichtert.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen, und Mutationen in NCF4 sind mit autosomal-rezessiver chronischer granulomatöser Krankheit (CGD) assoziiert, die durch wiederkehrende Infektionen gekennzeichnet ist.
• Das Protein wird an bestimmten Resten als Reaktion auf Reize wie Phorbolester phosphoryliert, was seine Bindungsaffinität an Membranen verstärkt und zur Zusammenlagerung des Oxidase-Komplexes beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-190 von humanem NCF4/p40-phox (NP_038202.2) abdeckt und die PX-Domäne umfasst. Validieren Sie die Antikörperspezifität für die beabsichtigte Anwendung im entsprechenden ProbenSystem.
• Für Western Blot (WB) hat NCF4/p40-phox ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 39 kDa. Bestätigen Sie die Wanderungsmuster unter Verwendung geeigneter Positivkontrollen und berücksichtigen Sie mögliche posttranslationale Modifikationen.
• Der Antikörper ist auch für ELISA geeignet und erkennt wahrscheinlich das native Protein. Eine Titrierung und Optimierung wird für jeden experimentellen Aufbau empfohlen.
• Da eine Kreuzreaktivität für Mensch, Maus und Ratte berichtet wird, können Sie diesen Antikörper für die Detektion von p40-phox über diese Spezies hinweg in Betracht ziehen, verifizieren Sie jedoch die Reaktivität in Ihren spezifischen Modellen.

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