Anti-NCBP2 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P52298

Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: NCBP2-Funktion und Lokalisation

• NCBP2 (auch bekannt als CBP20, NIP1, CBC2, PIG55) ist die 20 kDa große Untereinheit des nukleären Cap-Binding-Komplexes (CBC), der co-transkriptionell an das 5'-Cap von prä-mRNAs bindet und für verschiedene Aspekte des RNA-Stoffwechsels essenziell ist.
• Als Teil des CBC ist NCBP2 am prä-mRNA-Spleißen, am mRNA-Export (einschließlich U-snRNA- und intronlosem mRNA-Export), an der "Pioneer Round"-Translation, am Nonsense-vermittelten mRNA-Abbau (NMD) und an der microRNA-Biogenese beteiligt.
• Der CBC-Komplex ist entscheidend für die "Pioneer Round"-Translation, während der NMD stattfindet; er wird später für die Steady-State-Translation durch eIF4E ersetzt.
• NCBP2 erkennt und bindet direkt die m7GpppG-Cap-Struktur, benötigt jedoch NCBP1/CBP80, um die hochaffine Cap-Bindungskonformation zu stabilisieren.
• Der konventionelle Cap-Binding-Komplex mit NCBP2 bindet sowohl kleine nukleäre RNA (snRNA) als auch Boten-RNA (mRNA) und ist an deren Export aus dem Zellkern beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:26382858
• NCBP2 lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was seine Rollen bei der nukleären RNA-Prozessierung und der zytoplasmatischen Translationsregulation widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Phosphorylierung und Methylierung, die seine Aktivität modulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1-156 von NCBP2 und deckt die N-terminale Region ab; es wird erwartet, dass der Antikörper das Volllängenprotein erkennt.
• Für Western Blot liegt das vorhergesagte Molekulargewicht von NCBP2 bei ~18 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines 12%igen SDS-PAGE-Gels und einer PVDF-Membran für einen optimalen Transfer und Nachweis.
• In der Immunfluoreszenz/ICC zeigt NCBP2 sowohl eine nukleäre als auch eine zytoplasmatische Färbung; validieren Sie die subzelluläre Verteilung in Ihrem spezifischen Zelltyp unter Verwendung geeigneter Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis von NCBP2 in Zelllysaten oder Serumproben verwendet werden; verwenden Sie Negativ- und Positivkontrollen, um die Spezifität sicherzustellen.
• Da der Antikörper sowohl humanes als auch murines NCBP2 erkennt, kann er in speziesübergreifenden Anwendungen eingesetzt werden, jedoch sollte die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem immer bestätigt werden.

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