Anti-NCAPH Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15003

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NCAPH-Funktion und -Lokalisation

• NCAPH kodiert für die regulatorische Condensin-Komplex-Untereinheit 2 (auch bekannt als hCAP-H, CAP-H, BRRN1), die für die mitotische Chromosomenkondensation und -segregation essentiell ist.
• Der Condensin-Komplex, der NCAPH enthält, führt positive Supercoils in DNA ein und arbeitet mit Topoisomerasen zusammen, um Chromatin in mitotische Chromosomen zu kompaktieren (PubMed:11136719). Verwandte Referenzen: PMID:11136719
• In neuralen Stammzellen gewährleistet NCAPH eine präzise Chromosomenkondensation während der frühen Neurogenese, und Funktionsverlust-Mutationen führen über eine reduzierte Neuronproduktion zu primärer Mikrozephalie Typ 23 (MCPH23) (PubMed:27737959). Verwandte Referenzen: PMID:27737959
• Subzellulär lokalisiert NCAPH im Zytoplasma und Zellkern und assoziiert spezifisch während der Mitose mit Chromosomen.
• Das Protein unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindungsbildung), die wahrscheinlich seine mitotischen Funktionen regulieren.
• NCAPH wird in Geweben weit verbreitet auf niedrigem Niveau exprimiert, mit höherer Expression in proliferierenden Zellen, was zu seiner Rolle in der Zellteilung passt.
• Alternatives Spleißen des NCAPH-Gens erzeugt mehrere Transkriptvarianten, die möglicherweise Isoformen mit funktionellen Unterschieden hervorbringen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1‑250 (N‑terminaler Bereich) von humanem NCAPH; bedenken Sie, dass der Antikörper Epitope innerhalb dieser Domäne erkennt und Isoformen, die diese Sequenz enthalten, detektieren kann.
• Für Western Blotting (WB) ist in humanen Zelllysaten ein Band bei etwa 83 kDa zu erwarten; validieren Sie dies in einem relevanten Probensystem (z.B. HeLa, HEK293) und optimieren Sie Lade- und Transferbedingungen.
• In der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) zeigt NCAPH eine nukleäre und zytoplasmatische Färbung; verwenden Sie geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten, und verifizieren Sie die Kolokalisierung mit mitotischen Chromosomen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Nachweisreagenz verwendet werden; kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Capture-Antikörper für einen Sandwich-Assay und testen Sie mit rekombinantem NCAPH-Protein oder Zelllysaten.
• Als polyklonaler Antikörper können die Chargen-zu-Charge-Konsistenz und die Kreuzreaktivität mit eng verwandten Condensin-Untereinheiten variieren; bestätigen Sie die Spezifität in Ihrer Anwendung durch Knockdown/Knockout-Kontrollen oder durch Vergleich mit bekannten Expressionsmustern.

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