Anti-NBS1/NBN monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - O60934

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NBS1/NBN Funktion und Lokalisierung

• NBS1/NBN ist eine Schlüsselkomponente des MRE11-RAD50-NBN (MRN) Komplexes, der eine zentrale Rolle bei der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSB), der homologen Rekombination (HR), der Aufrechterhaltung der Telomerintegrität und der Meiose spielt. Verwandte Referenzen: PMID:10888888, PMID:15616588, PMID:18411307

• Innerhalb des MRN-Komplexes fungiert NBN als Protein-Protein-Adapter, der spezifisch phosphorylierte Proteine erkennt und bindet und die Rekrutierung von DNA-Reparaturfaktoren und Signalkinasen wie MRE11, RAD50, ATM, ATR und DNA-PKcs an DSB-Stellen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:12419185, PMID:18411307, PMID:18583988, PMID:15064416, PMID:15790808

• Der MRN-Komplex erleichtert die DNA-Endresektion durch die Endonuklease- und Exonukleaseaktivitäten von MRE11 und generiert einzelsträngige DNA für die HR; NBN rekrutiert zusätzlich phosphoryliertes CtIP (RBBP8), um die Resektion zu fördern und Protein-DNA-Addukte zu beseitigen. Verwandte Referenzen: PMID:19759395, PMID:28867292, PMID:9705271, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182

• NBS1/NBN trägt zur Regulierung der Telomerlänge bei, indem es in der G1-Phase mit TERF2 interagiert, um die Rekrutierung von DCLRE1B/Apollo zu verhindern, und die CDK2-vermittelte Phosphorylierung von NBN bestimmt die Wahl des Reparaturwegs (NHEJ vs. MMEJ) bei dysfunktionalen Telomeren. Verwandte Referenzen: PMID:10888888, PMID:28216226

• NBN ist ubiquitär exprimiert mit hohen Spiegeln in den Hoden und lokalisiert im Zellkern, auf Chromosomen, in PML-Körpern und an Telomeren, was konsistent mit seinen Rollen in der DNA-Reparatur und Zellzyklusregulation ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid hergestellt, das den Aminosäuren 655-754 von humanem NBN (O60934) entspricht. Diese Region liegt innerhalb der C-terminalen Domäne, die Protein-Protein-Interaktionen vermittelt, und es wird erwartet, dass sie vollständiges NBN detektiert. Für isoformspezifische Anwendungen sollten Sie die Verwendung von Peptiden in Betracht ziehen, die anderen Regionen zugeordnet sind.
• Validierte Anwendungen umfassen Western Blot (WB), Immunpräzipitation (IP) und ELISA mit humanen Proben. Für WB beträgt das Proteingewicht von NBN ca. 85 kDa. Die endogene Expression variiert; Hoden und aktiv teilende Zellen zeigen wahrscheinlich höhere Signale.
• Für die IP optimieren Sie die Antikörperkonzentration und die Bedingungen des Lysepuffers, um die Integrität des MRN-Komplexes zu wahren, da NBN fest mit MRE11 und RAD50 assoziiert ist.
• Für ELISA kann das synthetische Peptid-Immunogen oder das rekombinante NBN-Protein als Beschichtungsantigen dienen. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu.

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