Anti-NAGA Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P17050

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Alpha-N-Acetylgalactosaminidase (NAGA)

• NAGA kodiert Alpha-N-Acetylgalactosaminidase, auch bekannt als Alpha-Galaktosidase B, eine lysosomale Glykosidase.
• Es katalysiert die Abspaltung terminaler Alpha-N-Acetylgalactosamin-Reste von Glykolipiden und Glykopeptiden, was für den Glykolipid-Abbaustoffwechsel unerlässlich ist.
• Das Enzym ist im Lysosom lokalisiert, wo es am Abbau von Glykokonjugaten beteiligt ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung (Glykoprotein), Phosphorylierung (Phosphoprotein) sowie das Vorhandensein eines Signalpeptids und Disulfidbrücken, wie durch UniProt-Schlüsselwörter angegeben.
• Mutationen in NAGA sind mit Krankheiten assoziiert, wie durch das Schlüsselwort „Disease variant“ vermerkt, obwohl spezifische Phänotype variieren können; Epilepsie ist unter den assoziierten Schlüsselwörtern aufgeführt.
• Das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ca. 46,6 kDa (UniProt), während das Antikörperprodukt eine Bande bei 47 kDa erkennt, was mit der glykosylierten reifen Form übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde unter Verwendung eines rekombinanten Fragments entworfen, das den Aminosäuren 312–411 nahe dem C-Terminus von humanem NAGA (NP_000253.1) entspricht. Diese Region kann oberflächlich exponiert sein und ermöglicht möglicherweise die Erkennung von nativem und denaturiertem Protein.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande um 47 kDa erwartet; erwägen Sie die Verwendung eines positiven Kontrolllysats aus Geweben oder Zellen, von denen bekannt ist, dass sie NAGA exprimieren, wie z. B. lysosomenreiche Proben.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) wird eine Co-Färbung mit einem lysosomalen Marker empfohlen, um die lysosomale Lokalisierung zu bestätigen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus- und Rattenproben deutet auf eine konservierte Epitoperkennung hin; jedoch wird eine Sequenzausrichtung empfohlen, um die Epitopkonservierung zu verifizieren, wenn quantitative Speziesvergleiche beabsichtigt sind.
• Für ELISA-Anwendungen sollten die Beschichtungsbedingungen optimiert und ein rekombinantes NAGA-Protein oder -Peptid als Standardkurve verwendet werden, um quantitative Genauigkeit zu gewährleisten.

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