Anti-NAE1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q13564

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: NAE1-Funktion und Lokalisierung

• NAE1 ist die regulatorische Untereinheit des dimeren NEDD8-aktivierenden Enzyms E1 (UBA3-NAE1), das die Neddylierungskaskade initiiert.
• Es aktiviert NEDD8 durch Adenylierung seines C-terminalen Glycins mit ATP, bildet dann ein Thioester-verknüpftes NEDD8-UBA3-Intermediat, bevor NEDD8 auf das E2-Enzym UBE2M übertragen wird.
• Das Protein ist essentiell für den Zellzyklusfortschritt, insbesondere am S-M-Checkpoint, und seine Überexpression kann über deregulierte Neddylierung Apoptose auslösen.
• Neddylierung, die kovalente Anlagerung von NEDD8 an Zielproteine, reguliert Zellwachstum, Lebensfähigkeit und Entwicklung.
• NAE1 ist an der Zellmembran lokalisiert und seine Expression ist in fetalen Geweben und im gesamten adulten Gehirn allgegenwärtig.
• Alternatives Spleißen, Acetylierung und krankheitsassoziierte Varianten (z.B. geistige Behinderung) wurden für NAE1 berichtet.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 60 kDa (UniProt: 60246 Da; beobachtet ~60 kDa).
• Auch bekannt als APP-BP1 (Amyloid-beta-Vorläuferprotein-bindendes Protein 1), wurde es ursprünglich als Interaktionspartner des Amyloid-Vorläuferproteins identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 1-220 Aminosäuren von humanem NAE1; diese Region ist wahrscheinlich oberflächenexponiert und geeignet für die Erzeugung von Antikörpern, die das native Protein erkennen.
• Für Western Blot (WB) ist die erwartete Bandengröße ~60 kDa; ziehen Sie geeignete Kontrollen in Betracht (z.B. Lysate von Zellen mit bekannter NAE1-Expression) und validieren Sie die Kreuzreaktivität in Maus- und Rattenproben.
• Für ELISA kann der polyklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; titrieren Sie, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Da NAE1 an der Neddylierung beteiligt ist, kann der Antikörper nützlich sein, um die Dynamik der Proteinneddylierung zu untersuchen, bestätigen Sie jedoch die Spezifität mit Knockdown/Überexpressionsexperimenten.

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