Anti-N4BP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75113

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: N4BP1-Funktion und -Lokalisation

• N4BP1 (NEDD4-bindendes Protein 1) ist ein potenter Unterdrücker der Zytokinproduktion und ein wichtiger negativer Regulator der angeborenen Immunsignalgebung, der Entzündungsreaktionen auf schwache TLR-Reize begrenzt.
• Wirkt als Restriktionsfaktor gegen HIV-1, indem es virale mRNAs bindet und diese durch seine intrinsische Ribonuklease-Aktivität abbaut. Verwandte Referenzen: PMID:31133753
• Bei Infektion mit bedrohlicheren Pathogenen wird N4BP1 durch CASP8 stromabwärts von TLR3 oder TLR4 gespalten, was zu seiner Inaktivierung führt und die volle Zytokinproduktion ermöglicht.
• Hemmt die E3-Ubiquitin-Protein-Ligase ITCH, indem es über die zweite WW-Domäne von ITCH um Substratbindung konkurriert und so die Ubiquitinierung beeinträchtigt.
• Lokalisiert im Zytoplasma, Zytosol, Zellkern, Nukleolus und PML-Kernkörperchen, was auf eine multifunktionale zelluläre Verteilung hindeutet.
• In einer Vielzahl von Geweben nachgewiesen, einschließlich Herz, Lunge, Gehirn, Leber, Skelettmuskel, Bauchspeicheldrüse, Niere, Milz, Hoden und Eierstock.
• Schlüsselwörter von UniProt heben seine Rollen als Hydrolase, Nuklease, RNA-bindendes Protein und Phosphoprotein hervor, die an der angeborenen Immunität beteiligt sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 190–590 von murinem N4BP1, einer Region, die die NYN (RNase)-Domäne und einen Teil der ITCH-interagierenden Region enthält. Dieses Design soll einen Antikörper hervorbringen, der N4BP1 in voller Länge unter denaturierenden und nativen Bedingungen erkennt.
• Für Western Blot sollte ein Startverdünnungsbereich von 1:500–1:2000 in Betracht gezogen und mit relevanten Positivkontrollen validiert werden (z. B. humane oder murine Zelllysate, von denen bekannt ist, dass sie N4BP1 exprimieren).
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC die nukleare und zytoplasmatische Lokalisation mit geeigneten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokollen bestätigen; die Einbeziehung von PML-Körperchen-Markern kann Co-Lokalisierungsstudien unterstützen.
• Der Antikörper ist für ELISA validiert und möglicherweise für den Einsatz als Capture- oder Detektionsantikörper in Sandwich-Assays geeignet; optimieren Sie die Beschichtungs- und Detektionsbedingungen für Ihr spezifisches Immunoassay-Format.
• Die Kreuzreaktivität mit humanem und murinem N4BP1 ist angegeben; dennoch sollte die Spezifität in Ihrem experimentellen System überprüft werden, insbesondere wenn Sie mit Proben anderer Spezies arbeiten.

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