Anti-Myeloperoxidase (Mpo) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P11247

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Myeloperoxidase (Mpo) Funktion und Lokalisierung

• Myeloperoxidase (Mpo) ist eine Häm- und Eisen-haltige Peroxidase, die hoch in azurophilen Granula von Neutrophilen exprimiert wird und als Homodimer aus glykosylierten schweren und leichten Ketten funktioniert, die durch Disulfidbrücken verbunden sind.
• Als Schlüsseleffektor der angeborenen Immunität katalysiert Mpo die Umwandlung von Wasserstoffperoxid und Chloridionen in hypochlorige Säure (HOCl), ein potentes mikrobizides Oxidationsmittel.
  Verwandte Referenzen: PMID:11593004
• Mpo ist zentral für die Bildung von neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs), einem Prozess, bei dem es in den Zellkern transloziert, Nukleosomen zerstört und die Chromatin-Dekondensation fördert, um extrazelluläre DNA-Netze zu bilden, die Krankheitserreger einfangen.
  Verwandte Referenzen: PMID:10085024, PMID:23306200
• Die direkte mikrobizide Aktivität von Mpo wird durch seine Fähigkeit verstärkt, verschiedene Substrate zu oxidieren und dabei zusätzliche reaktive Spezies wie hypobromige Säure, Stickstoffdioxidradikal und Protein-Tyrosinradikale zu erzeugen.
• Mpo ist ein Multi-Kompartiment-Protein: gespeichert in zytoplasmatischen azurophilen Granula, bei Infektion in Phagosomen transloziert und aktiv sezerniert; während der NETose lokalisiert es im Zellkern und an Chromosomen.
• Die Enzymaktivität ist kalziumabhängig, und seine reife Form wird durch intrakettige Disulfidbrücken stabilisiert, wobei posttranslationale Modifikationen wie N-Glykosylierung für die korrekte Faltung und Aktivität entscheidend sind.
• Darüber hinaus trägt Mpo zu entzündlichem Gewebeschaden bei, indem es Wirtsproteine wie Apolipoprotein A-I chloriert und nitriert und so den Cholesterin-Efflux beeinträchtigt und Atherosklerose fördert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen, ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 16–718 der murinen Mpo abdeckt, umfasst fast die gesamte Vorläufersequenz (außer dem Signalpeptid), was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl das Proenzym als auch die prozessierten schweren/leichten Ketten erkennen kann.
• Für Western Blot ist das vorhergesagte Molekulargewicht für den Vorläufer ~81 kDa; unter reduzierenden Bedingungen können je nach Probenaufbereitung und Zelltyp auch die schwere (~60 kDa) und leichte (~15 kDa) Kette detektiert werden.
• Für Immunfluoreszenz und Immunhistochemie sollten Permeabilisierungs- und Antigen-Retrieval-Protokolle optimiert werden, um Mpo in azurophilen Granula (zytoplasmatisch), Phagosomen oder während der NETose bei nukleärer Lokalisierung nachzuweisen.
• Der Antikörper ist für ELISA validiert; sorgen Sie für geeignete Beschichtungsbedingungen und schließen Sie geeignete Blockierungs- und Waschschritte ein, um den Hintergrund zu minimieren.
• Kreuzreaktivität mit humaner und Ratten-Mpo wurde nachgewiesen, aber die Signalintensität kann variieren; validieren Sie Verdünnungsreihen in der relevanten Spezies und im Gewebekontext.

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