Kaninchen-polyklonaler Anti-Myeloperoxidase-(MPO)-Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – P05164

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Myeloperoxidase (MPO)

• MPO ist eine hämhaltige Peroxidase, die eine entscheidende Rolle im angeborenen Immunsystem spielt und hauptsächlich in Neutrophilen und Monozyten exprimiert wird.
• Sie vermittelt die Bildung neutrophiler extrazellulärer Fallen (NETs), indem sie in den Zellkern transloziert, an Nukleosomen bindet und ATP-unabhängig eine Dekondensation des Chromatins sowie die Entwindung der DNA induziert. Zugehörige Referenzen: PMID:40963017
• Als Peroxidase katalysiert MPO die Bildung von hypochloriger Säure (HOCl), hypobromiger Säure und anderen reaktiven Oxidationsmitteln aus Wasserstoffperoxid. Diese sind für die mikrobizide Aktivität gegen ein breites Spektrum von Krankheitserregern unerlässlich. Zugehörige Referenzen: PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335
• MPO oxidiert außerdem Nitrit zum Stickstoffdioxidradikal und trägt dadurch zur Proteinnitrierung sowie zur Modulation entzündlicher Signalwege bei. Zugehörige Referenzen: PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756
• Das Enzym ist in den azurophilen Granula (Lysosomen) der Neutrophilen lokalisiert und wird bei der Degranulation in das Phagosom oder in den Extrazellularraum freigesetzt; es wurde außerdem im Zellkern und auf Chromosomen nachgewiesen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die Bindung von Häm, die Koordination von Kalzium und die N-Glykosylierung; das reife Protein ist ein Tetramer aus zwei leichten und zwei schweren Ketten, die aus einem einzigen Vorläuferprotein hervorgehen.
• MPO kann Apolipoprotein A-I (APOA1) chlorieren und nitrifizieren, wodurch der Cholesterinausstrom beeinträchtigt wird und möglicherweise zur Atherosklerose beigetragen wird. Zugehörige Referenzen: PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• Die Peroxidaseaktivität kann durch das S.-aureus-Protein SPIN gehemmt werden, was eine Strategie zur Umgehung der Immunabwehr darstellt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem C-terminalen Abschnitt der schweren MPO-Kette (Aminosäuren 606–745), der möglicherweise auf eine über die Spezies hinweg konservierte Region abzielt. Dies steht im Einklang mit der berichteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte.
• Beim Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von MPO etwa 84 kDa (Vorläuferprotein) beziehungsweise nach der Prozessierung 59 kDa (schwere Kette) und 13,5 kDa (leichte Kette). Erwägen Sie eine Optimierung der Probenvorbereitung, um sowohl Vorläufer- als auch reife Formen nachzuweisen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF-P) sollte der Antikörper in geeigneten Gewebe- oder Zellsystemen validiert werden, beispielsweise in entzündetem, neutrophilenreichem Gewebe oder isolierten Blutzellen, um eine spezifische Färbung zu bestätigen.
• Führen Sie geeignete Kontrollen durch (z. B. Isotypkontrolle und Peptidblockierung) und titrieren Sie die Antikörperkonzentrationen für jede Anwendung, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.

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