Anti-Myeloperoxidase (MPO) Kaninchen-mAk für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05164

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Myeloperoxidase (MPO) Funktion und Lokalisierung

• Myeloperoxidase ist ein eisenhaltiges Hämprotein, das spezifisch in Neutrophilen und Monozyten exprimiert wird. Es wird als Vorläufer synthetisiert und zu leichten und schweren Ketten prozessiert.
• Funktioniert bei der Bildung von neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs): Sie translokalisiert in den Zellkern, bindet Nukleosomen und treibt die Chromatin-Dekondensation und DNA-Extrusion voran, um Pathogene einzufangen. Verwandte Referenzen: PMID:40963017
• Wirkt als Peroxidase zur Produktion von hypochloriger Säure (HOCl) und anderen hypohalogenen Säuren (HOBr, HOI, HOSCN) in Gegenwart von H₂O₂ und verstärkt so die mikrobizide Aktivität. Verwandte Referenzen: PMID:16125131, PMID:17074761, PMID:17438335, PMID:1318692
• Katalysiert die Oxidation von Nitrit zum Stickstoffdioxid-Radikal und erzeugt reaktive Spezies, die Proteinreste (z.B. APOA1) chlorieren und nitrieren, was den Cholesterintransport beeinträchtigt. Verwandte Referenzen: PMID:10777476, PMID:8385644, PMID:9450756, PMID:15314690, PMID:15326314, PMID:15498770, PMID:15574409
• Oxidiert Melatonin und Urat, wirkt als Stickstoffmonoxid-Oxidase zur Regulierung des Gefäßtonus und spaltet Alpha-1-Mikroglobulin, um eine Form zu produzieren, die die LDL-Oxidation hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:15636586, PMID:16148002, PMID:21266577, PMID:12089442, PMID:25698971
• Die Peroxidase-Aktivität wird durch den S.aureus Peroxidase-Inhibitor SPIN gehemmt, der den Substratzugang zum katalytischen Häm blockiert.
• Lokalisiert hauptsächlich in Lysosomen und zytoplasmatischen Granula in Neutrophilen; bei Aktivierung wird sie sezerniert oder in den Zellkern transloziert und kann sich mit Chromosomen assoziieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 84 kDa; validieren Sie mit geeigneten positiven Kontrollen wie Neutrophilen- oder Monozytenlysaten. Bestätigen Sie das erwartete Bandenmuster unter Berücksichtigung von Vorläufer- und prozessierten Ketten.
• Für IHC-P kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; optimieren Sie mit FFPE-Schnitten von gewebereichen Neutrophilen, z.B. Knochenmark oder entzündetem Gewebe.
• Für IF/ICC sollten Permeabilisierungsprotokolle in Betracht gezogen werden, um Zugang zu intrazellulärem granuliertem und nukleärem MPO zu erhalten; verwenden Sie geeignetes Blockieren, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Fügen Sie geeignete negative Kontrollen ein und erwägen Sie, die Kreuzreaktivität in Maus- und Rattenproben wie angegeben zu testen.
• Die ELISA-Leistung sollte mit rekombinantem MPO oder nativem Protein in relevanten biologischen Flüssigkeiten validiert werden.

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