Anti-MUC4 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q99102

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MUC4-Funktion und -Lokalisierung

• MUC4 ist ein hochmolekulares (542 kDa) transmembranes Glykoprotein, das zur Muzin-Familie gehört und durch extensive O-Glykosylierung sowie eine große extrazelluläre Domäne mit EGF-ähnlichen Wiederholungen gekennzeichnet ist.
• Es dient als Hauptkomponente der Schleimschicht, stellt eine Schutzbarriere auf Epitheloberflächen dar und trägt zur Erneuerung und Differenzierung von Epithelzellen bei. Verwandte Referenzen: PMID:10880978
• MUC4 fungiert als intramembraner Ligand für den Rezeptor-Tyrosinkinase ERBB2, induziert die ERBB2-Phosphorylierung und moduliert nachgelagerte Signalwege, um die Zellproliferation, -differenzierung und den Zelltod zu beeinflussen; es kann Komplexe mit ERBB3 und NRG1 bilden, die den Zelltod unterdrücken und das Tumorwachstum fördern. Verwandte Referenzen: PMID:10880978
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen und enthält Disulfidbrücken, EGF-ähnliche Domänen und eine Transmembranhelix; es ist mit Schlagworten wie Glykoprotein, Zelladhäsion und sekretiert (bezogen auf seine abgegebene Ektodomäne) annotiert.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran als Typ-I-Membranprotein, aber die Ektodomäne kann gespalten und sezerniert werden; sie befindet sich in Membran- und Sekretfraktionen.
• Die Gewebeexpression ist breit: normale Expression in Thymus, Schilddrüse, Lunge, Luftröhre, Speiseröhre, Magen, Dünndarm, Dickdarm, Hoden, Prostata, Eierstock, Uterus, Plazenta, Brust- und Speicheldrüsen; es ist in multiplen Karzinomen überexprimiert, einschließlich Pankreas-, Lungen-, Brust-, Gallen-, Dickdarm- und Zervixkarzinomen, während es in der normalen Bauchspeicheldrüse minimal ist.
• Aufgrund seiner Rolle bei der Modulation der Zelladhäsion und der Interaktion mit ERBB2 ist MUC4 in den epithelial-mesenchymalen Übergang und die Krebsprogression involviert, was es zu einem wertvollen Marker in der Onkologieforschung macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich innerhalb des C-terminalen Teils von MUC4 (Aminosäuren 4807-4916), der Teil der extrazellulären Domäne ist. Dieser Bereich ist möglicherweise weniger glykosyliert als die Tandem-Wiederholungsregion und bietet potenziell eine höhere Spezifität bei der Erkennung des Kernproteins.
• Aufgrund der großen Größe von MUC4 (542 kDa) sollte die Verwendung von niedrigprozentigem SDS-PAGE (z. B. 4-6 %) für Western Blots in Betracht gezogen werden, um die Transfer-Effizienz zu verbessern. Verlängerte Transferzeiten und niedrige Spannung können die Detektion verbessern.
• Für IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden (wie hitzeinduzierte Epitop-Retrieval in Citratpuffer, pH 6,0) erforderlich sein; eine Validierung an bekannten positiven und negativen Gewebekontrollen (z. B. Pankreastumor vs. normale Bauchspeicheldrüse) wird empfohlen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Ratte wurde berichtet; eine Validierung in Rattenproben sollte durchgeführt werden, um die Eignung für Nagetierstudien zu bestätigen.
• Aufgrund des hohen Molekulargewichts und der starken Glykosylierung kann die Lysatherstellung Ultraschallbehandlung und die Verwendung von denaturierenden Bedingungen erfordern, um die Löslichkeit sicherzustellen.

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