Anti-MT-ATP8 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P03928

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MT-ATP8 Funktion und Lokalisierung

• MT-ATP8 kodiert für die ATP-Synthase F(0)-Komplex-Untereinheit 8, auch bekannt als A6L oder F-ATPase-Untereinheit 8, eine Kernkomponente des mitochondrialen oxidativen Phosphorylierungssystems.
• Es ist eine integrale Untereinheit der membrangebundenen F(0)-Domäne der ATP-Synthase (Komplex V), die ATP aus ADP unter Nutzung des durch die Atmungskette erzeugten Protonengradienten produziert. Verwandte Referenzen: PMID:37244256
• Als Teil des F(0)-Protonenkanals ist MT-ATP8 am Rotationsmechanismus beteiligt, der den Protonentransport über die innere Mitochondrienmembran mit der ATP-Synthese in der katalytischen F(1)-Domäne koppelt.
• Das Protein ist in der Mitochondrienmembran lokalisiert (UniProt: P03928).
• Es wird vorhergesagt, eine einzelne Transmembranhelix zu enthalten, die es in der Lipiddoppelschicht verankert (UniProt-Keywords: Transmembran, Transmembranhelix).
• Posttranslationale Acetylierung wurde identifiziert, was möglicherweise seine Funktion reguliert (UniProt-Keyword: Acetylierung).
• Mit Erkrankungen assoziierte Varianten in MT-ATP8 werden mit primären mitochondrialen Erkrankungen in Verbindung gebracht, einschließlich Kardiomyopathie (UniProt-Keywords: Kardiomyopathie, Krankheitsvariante, Primäre mitochondriale Erkrankung).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das von der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–68) des humanen MT-ATP8 abgeleitet ist. Dieses peptidbasierte Design kann Reaktivität gegen sowohl denaturierte als auch native Proteinziele verleihen; eine Validierung im relevanten experimentellen System wird jedoch empfohlen.
• Aufgrund seines geringen Molekulargewichts (8 kDa) sollten bei der Western-Blot-Analyse optimale Transfer- und Detektionsbedingungen sichergestellt werden, wie z.B. die Verwendung von Membranen mit hoher Rückhaltefähigkeit und verlängerte Transferzeiten für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte eine Optimierung der Antigen-Demaskierung und Permeabilisierungsschritte in Betracht gezogen werden, um Zugang zum mitochondrial membrangelokalisierten Epitop zu erhalten.
• Dem Antikörper wird aufgrund von Sequenzähnlichkeiten Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen zugeschrieben. Eine unabhängige Verifizierung wird empfohlen, wenn artspezifische Detektion entscheidend ist.
• Die ELISA-Leistung kann durch das Beschichtungsantigen und die Pufferbedingungen beeinflusst werden; Titrationsexperimente werden vorgeschlagen, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.

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