Anti-MSH6 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P52701

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MSH6 Funktion und Lokalisation

• DNA-Mismatch-Reparaturprotein Msh6, auch bekannt als G/T-Mismatch-bindendes Protein (GTBP) oder p160, ist ein Bestandteil des postreplikativen DNA-Mismatch-Reparatur(MMR)-Systems.
• Bildet ein Heterodimer mit MSH2, um den MutS-alpha-Komplex zu bilden, der einzelne Basenfehlpaarungen und Dinukleotid-Insertions-Deletionsschleifen (IDLs) in der DNA erkennt, die Helix biegt und nach der Bindung etwa 20 Basenpaare abschirmt.
• Nach der Erkennung von Fehlpaarungen rekrutiert MutS alpha MutL alpha zur Bildung eines ternären Komplexes, was nachgeschaltete Reparaturvorgänge einschließlich Strangunterscheidung, Exzision und Neusynthese auslöst.
• ATP-Bindung und Hydrolyse wirken als molekularer Schalter: fehlgepaarte DNA induziert den ADP→ATP-Austausch, wodurch MutS alpha zu einer Gleitklemme umgewandelt wird, die entlang der DNA diffundiert – ein Prozess, der für die Mismatch-Reparatur essenziell ist.
• Wird in der G1- und frühen S-Phase über seine PWWP-Domäne zum Chromatin rekrutiert, die spezifisch an Histon H3 bindet, das an Lys36 trimethyliert ist (H3K36me3), was die frühe Markierung von Replikationsursprüngen ermöglicht.
• Lokalisiert im Zellkern und auf Chromosomen; Mutationen in MSH6 sind mit hereditärem nicht-polypösem Kolorektalkrebs (HNPCC/Lynch-Syndrom) anderen Krankheitsvarianten assoziiert.
• Annotiert mit Schlüsselwörtern: DNA-Schaden, DNA-Reparatur, DNA-bindend, ATP-bindend, nukleotidbindend, Wirts-Virus-Interaktion und alternatives Spleißen, was seine vielfältigen regulatorischen Rollen widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches Peptid vom N-Terminus ist, stellen Sie sicher, dass der Antikörper das native Protein erkennt, indem Sie in einem System validieren, das vollständiges MSH6 exprimiert, z. B. HeLa- oder MCF7-Zelllysate für WB.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigenretrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA pH 9,0) und beachten Sie, dass MSH6 nukleär ist; bewerten Sie die Färbung in menschlichem kolorektalen Adenokarzinom oder Tonsillengewebe als Positivkontrolle.
• In IF/ICC permeabilisieren Sie Zellen ausreichend, um Zugang zu nukleären Antigenen zu erhalten, und erwägen Sie eine Kofärbung mit einem Kernmarker zur Bestätigung der Lokalisation.
• Für ELISA kann ein gepaarter Antikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop erforderlich sein; validieren Sie mit rekombinantem MSH6-Protein oder Peptid-Wettbewerbsassays.
• Da MSH6 ein großes Protein (153 kDa) ist, verwenden Sie für WB geeignete Gelprozentsätze (z. B. 6-8% SDS-PAGE) und verlängerte Transferzeiten.

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