Anti-MSH6 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P52701

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MSH6-Funktion und Lokalisierung

• MSH6 kodiert das DNA-Fehlpaarungsreparaturprotein Msh6, auch bekannt als GTBP, GTMBP, MutS-Protein-Homolog 6 und p160, eine Schlüsselkomponente des postreplikativen Fehlpaarungsreparatursystems (MMR).
• Es heterodimerisiert mit MSH2, um den MutS-alpha-Komplex zu bilden, der Einbasen-Fehlpaarungen und kleine Insertions-Deletions-Schleifen erkennt und die DNA-Reparatur einleitet.
• MutS-alpha bindet an fehlgepaarte DNA, biegt die Helix, schirmt etwa 20 Basenpaare ab und rekrutiert MutL-alpha, um nachgelagerte Reparaturereignisse zu steuern, einschließlich Strangdiskriminierung, Exzision und Resynthese.
• ATP-Bindung und -Hydrolyse durch MSH6 fungieren als molekularer Schalter: Fehlpaarungs-DNA löst einen ADP→ATP-Austausch aus, der eine Konformationsänderung induziert, die MutS-alpha in eine gleitende Klemme für die Diffusion entlang der DNA umwandelt.
• Die PWWP-Domäne von MSH6 bindet spezifisch an trimethyliertes Lysin 36 von Histon H3 (H3K36me3) und vermittelt dessen Rekrutierung zum Chromatin in G1 und früher S-Phase, um die DNA-Replikation mit der Fehlpaarungserkennung zu verknüpfen.
• Lokalisiert im Kern und auf Chromosomen ist MSH6 entscheidend für die Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität; seine Dysfunktion ist mit dem Lynch-Syndrom (erblicher nicht-polypöser kolorektaler Krebs) und anderen Malignomen assoziiert.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von ca. 153 kDa, was mit seiner großen vorhergesagten Masse von 152 786 Da übereinstimmt, und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) von humanem MSH6, die die PWWP-Domäne enthält; beachten Sie, dass das Epitop durch H3K36me3-Interaktionen in fixiertem Chromatin maskiert sein könnte.
• Für Western Blot wird eine Bande um 153 kDa erwartet; aufgrund der großen Größe verwenden Sie SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten.
• Bei IF/ICC ist Kernfärbung zu erwarten; eine Kolokalisierung mit Chromatinmarkern erfordert möglicherweise eine Optimierung der Permeabilisierung.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproben (Mensch, Maus, Ratte validiert), überprüfen Sie jedoch vor der Verwendung die Sequenzhomologie in der Immunogenregion für andere Spezies.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise die Paarung mit einem geeigneten Detektionsantikörper; erwägen Sie die direkte Beschichtung mit synthetischem Peptid oder rekombinantem MSH6.

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