Anti-MSH2 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper (KO validiert) für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P43246

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: MSH2-Funktion und Lokalisierung

• MSH2 ist eine zentrale Komponente des DNA-Mismatch-Reparatur (MMR)-Systems, essenziell für die Erhaltung der Genomstabilität durch Korrektur von Basen-Basen-Fehlpaarungen und Insertions-Deletionsschleifen (IDLs), die während der DNA-Replikation entstehen.
• Es bildet zwei Heterodimere: MutSα mit MSH6, das einzelne Basenfehlpaarungen und kleine (1–2 Nukleotid) IDLs erkennt, und MutSβ mit MSH3, das größere IDLs bis zu 13 Nukleotiden Länge erkennt.
• Nach der Fehlpaarungsbindung biegt das MutS-Heterodimer die DNA und schützt ungefähr 20 Basenpaare, anschließend rekrutiert es das MutLα-Heterodimer (MLH1-PMS2) zur Bildung eines ternären Komplexes, der nachgeschaltete Reparaturvorgänge steuert, einschließlich Strangdiskriminierung, Exzision und Neusynthese.
• MSH2 rekrutiert die DNA-Helikase MCM9 zum Chromatin, die den DNA-Strang mit der Fehlpaarung abwickelt, um die Reparatur zu erleichtern (PubMed:26300262).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:26300262
• Die ATPase-Aktivität von MutSα fungiert als molekularer Schalter: Fehlpaarungsbindung löst den ADP→ATP-Austausch aus, induziert eine Konformationsänderung, die MutSα in einen gleitenden Klemm umwandelt, der entlang der DNA diffundieren kann – ein kritischer Schritt für die MMR.
• Über die MMR hinaus kann MSH2 auch an der homologen DNA-Rekombinationsreparatur teilnehmen und moduliert die UV-B-induzierte Zellzyklusregulation und Apoptose in Melanozyten.
• MSH2 wird ubiquitär in allen Geweben exprimiert und lokalisiert hauptsächlich im Kern und auf Chromosomen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; Mutationen in MSH2 sind mit dem hereditären nichtpolypösen Kolorektalkrebs (HNPCC/Lynch-Syndrom) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Erwarten Sie bei Western Blot eine spezifische Bande in der Nähe von 105 kDa. Fügen Sie eine knockout (KO) validierte Probe hinzu, um die Antikörperspezifität zu bestätigen.
• In Immunpräzipitations (IP)-Assays kann der Antikörper MSH2 und seine Bindungspartner (z. B. MSH6, MSH3, MLH1) herunterziehen. Optimieren Sie die Pufferbedingungen, um Proteininteraktionen zu erhalten.
• Erwarten Sie bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) eine nukleäre Lokalisierung. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden, um die Zugänglichkeit zum Ziel zu gewährleisten.
• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1–300); Epitope in dieser Region sind wahrscheinlich gut exponiert und konserviert, was möglicherweise die Kreuzreaktivität mit Ratte unterstützt.
• Titrieren Sie den Antikörper bei der Verwendung von ELISA, um die optimale Beschichtungskonzentration und den Detektionsbereich zu bestimmen; wählen Sie je nach Assay-Design ein direktes oder Sandwich-Format.

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