Anti-MSH2 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P43246

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNA-Mismatch-Reparaturprotein Msh2 Funktion und Lokalisierung

• Kernkomponente des post-replikativen DNA-Mismatch-Reparatur (MMR)-Systems. Bildet zwei Heterodimere: MutS alpha (mit MSH6) und MutS beta (mit MSH3), die an fehlgepaarte DNA binden, um die Reparatur zu initiieren.
• MutS alpha erkennt Einzelbasen-Fehlpaarungen und kleine Insertions-Deletions-Schleifen (1–2 Nukleotide), während MutS beta größere Schleifen bis zu 13 Nukleotiden erkennt.
• Nach der Bindung krümmen die Heterodimere die DNA, schirmen etwa 20 Basenpaare ab und rekrutieren MutL alpha, um die Strangdiskriminierung, Exzision und Resynthese zu koordinieren.
• Rekrutiert die DNA-Helikase MCM9 zum Chromatin und erleichtert das Entwinden des fehlgepaarten Strangs. Verwandte Referenzen: PMID:26300262
• ATP-Bindung und -Hydrolyse wirken als molekularer Schalter: Fehlgepaarte DNA löst den ADP→ATP-Austausch aus, der MutS alpha in eine gleitende Klammer umwandelt, die entlang der DNA diffundiert und nachgeschaltete Reparaturereignisse ermöglicht.
• Spielt auch eine Rolle bei der DNA-homologen Rekombinationsreparatur und kann in Melanozyten die UV-B-induzierte Zellzyklusregulation und Apoptose modulieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nukleär und chromosomen-assoziiert, was mit ihrer Überwachungsfunktion für das Genom übereinstimmt. Ubiquitär in Geweben exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung. Wirkt als Tumorsuppressor; Mutationen sind mit hereditärem nicht-polypösem kolorektalem Karzinom (HNPCC/Lynch-Syndrom) assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen 1–300 Aminosäuren von humanem MSH2. Als polyklonaler Antikörper erkennt er mehrere Epitope innerhalb dieser Region, was eine robuste Detektion ermöglichen kann, jedoch sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz überprüft werden.
• Das erwartete Molekulargewicht beträgt 105 kDa. Geeignete positive Kontrollen sind häufig verwendete humane Zelllinien (z.B. HeLa, HEK293) und Maus-/Rattengewebe, angesichts der ubiquitären Expression von MSH2.
• Für Western Blot (WB) können Standardprotokolle verwendet werden; erwägen Sie eine Optimierung der Blockierung und Antikörperverdünnung für den spezifischen Probentyp.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine nukleäre Färbung zu erwarten. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden, um nukleäre Antigene zu erhalten.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht translationale Studien, eine Validierung im relevanten Proben-/Zellsystem wird jedoch empfohlen.

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