Anti-MRE11-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P49959

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MRE11-Funktion und -Lokalisierung

• MRE11 ist eine Kernkomponente des MRN-Komplexes, essentiell für die Reparatur von Doppelstrangbrüchen, DNA-Rekombination, Telomererhaltung und Meiose. Verwandte Referenzen: PMID:11741547, PMID:14657032, PMID:22078559
• Der MRN-Komplex erleichtert die Reparatur durch homologe Rekombination, indem er die DNA-Endresekion vermittelt. MRE11 spaltet zunächst endonukleolytisch den 5'-Strang, um NHEJ zu verhindern, und erzeugt dann durch Exonukleaseaktivität einzelsträngige 3'-DNA, wodurch eine weitreichende Resektion durch EXO1 und DNA2 ermöglicht wird. Verwandte Referenzen: PMID:24316220, PMID:28867292
• MRE11 besitzt sowohl einzelsträngige Endonuklease- als auch doppelstrangspezifische 3'-5'-Exonukleaseaktivitäten. Seine Endonukleaseaktivität wird spezifisch durch RBBP8/CtIP gefördert, um Protein-DNA-Addukte zu entfernen und saubere DSB-Enden zu erzeugen. Verwandte Referenzen: PMID:11741547, PMID:22078559, PMID:24316220, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182
• Der MRN-Komplex ist für die DNA-Schadenssignalisierung durch Aktivierung der ATM- und ATR-Kinasen erforderlich, eine Rolle, die unabhängig von der Nukleaseaktivität von MRE11 ist. Verwandte Referenzen: PMID:14657032, PMID:15064416, PMID:15790808
• An Telomeren kann der MRN-Komplex die Bildung von t-Schleifen (t-loops) modulieren und zur Telomerintegrität beitragen. Verwandte Referenzen: PMID:10888888
• Der MRN-Komplex ist auch an der Verarbeitung von R-Schleifen und der Aktivierung des cGAS-STING angeborenen Immunwegs während der Tumorentstehung beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:31537797
• MRE11 enthält zwei DNA-Bindungsdomänen, die die Bindung sowohl an einzelsträngige als auch an doppelsträngige DNA ermöglichen.
• MRE11 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, und Mutationen werden mit Krankheitsvarianten und Ziliopathien in Verbindung gebracht.
• MRE11 lokalisiert im Zellkern, an den Chromosomen und an den Telomeren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 290-485 von menschlichem MRE11, einer zentralen Region. Es wird erwartet, dass dieser polyklonale Antikörper vollständiges MRE11 (81 kDa) in denaturierenden Western Blots (WB) nachweist. Optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers (z. B. 1:500-1:2000) für Ihr experimentelles System.
• Für die Immunpräzipitation (IP) sollten Sie mindestens 2–5 µg Antikörper pro 500 µg Zelllysat verwenden. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu und validieren Sie das Zielband mittels Massenspektrometrie oder siRNA-Knockdown, falls erforderlich.
• In ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper gegen das Immunogen oder das gereinigte Protein, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen. Bestätigen Sie die Spezifität durch Tests gegen nicht verwandte Antigene.
• Da eine Kreuzreaktivität für Mensch und Ratte berichtet wird, validieren Sie den Antikörper in Ihrer Spezies und im Gewebe von Interesse unter Verwendung von positiven Kontrollen, von denen bekannt ist, dass sie MRE11 exprimieren.

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