Anti-Maus Ythdc1 polyklonaler Antikörper für WB - E9Q5K9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des YTH-Domänen-enthaltenden Proteins 1

• Erkennt und bindet N6-Methyladenosin (m6A)-haltige RNAs und fungiert als Schlüsselregulator des alternativen Spleißens. Es fördert den Exon-Einschluss durch Rekrutierung von SRSF3 an m6A-Stellen oder verhindert das Exon-Skipping durch Interferenz mit der SRSF10-Bindung (PubMed:29262316, PubMed:29799838). Verwandte Referenzen: PMID:29262316 PMID:29799838
• Erleichtert den Kernexport von m6A-haltigen mRNAs durch Interaktionen mit SRSF3 und NXF1.
• Steuert den S-Adenosyl-L-Methionin-Homöostase durch Modulation der Expression von MAT2A-Transkripten, wahrscheinlich über m6A-Bindung innerhalb dieser mRNAs (PubMed:29262316). Verwandte Referenzen: PMID:29262316
• Beteiligt sich an der zufälligen X-Chromosom-Inaktivierung durch Bindung an m6A-modifizierte Xist-RNA und Förderung ihrer transkriptionsrepressiven Funktion.
• Essentiell für die Keimbahnentwicklung, speziell für die Spermatogonienentwicklung bei Männchen und das Oozytenwachstum/-reifung bei Weibchen, hauptsächlich durch seine Rolle bei der Regulation des alternativen Spleißens (PubMed:29799838). Verwandte Referenzen: PMID:29799838
• Unabhängig von seiner m6A-Reader-Aktivität stabilisiert es PPARG, indem es die ARIH2-vermittelte Ubiquitinierung verhindert, und fördert so die Entwicklung des braunen Fettgewebes und die Energiehomöostase (PubMed:40355558). Verwandte Referenzen: PMID:40355558
• Lokalisiert hauptsächlich im Zellkern und in Kernflecken, was mit seinen Rollen in der mRNA-Verarbeitung übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation (Isopeptidbindungsbildung).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 597-736 von Maus Ythdc1, einer C-terminalen Region, die in nativen und denaturierten Proteinkonformationen zugänglich sein könnte. Diese Region schließt die bekannte YTH-Domäne (ca. Reste 400–540) aus, was potenziell die Kreuzreaktivität mit anderen m6A-Reader-Proteinen verringert, obwohl eine experimentelle Validierung empfohlen wird.
• Für Western Blotting (WB) ist ein Band bei etwa 85 kDa in Mausgewebe-Lysaten zu erwarten. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen und validieren Sie mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen (z.B. Ythdc1-Knockout-Gewebe oder -Zellen), um die Spezifität zu bestätigen.
• In ELISA-Anwendungen kann das als Immunogen verwendete rekombinante Protein als Positivkontroll-Standard dienen, um Beschichtungskonzentrationen und Antikörperverdünnungen zu optimieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Epitope erkennen, was ein robustes Signal, aber auch ein erhöhtes Hintergrundrisiko bietet. Schließen Sie Blockierungsmittel und Optimierungsschritte, die für polyklonale Antikörper geeignet sind, in Ihr Protokoll ein.

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