Anti-Maus IL-12 p40 monoklonaler Antikörper () für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P43432

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL-12 p40 Funktion und Lokalisierung

• IL-12 p40 ist eine Untereinheit von Interleukin-12 (IL-12) und Interleukin-23 (IL-23), zentrale Zytokine in der Immunregulation.
• In IL-12 paart es sich mit p35, um das biologisch aktive IL-12p70 zu bilden, das die Th1-Differenzierung und IFN-γ-Produktion fördert.
• Als Bestandteil von IL-23 bildet p40 mit p19 (IL23A) einen Komplex, der Th17-Antworten und die Freisetzung proinflammatorischer Zytokine antreibt.
• IL-12 p40 wirkt als Wachstumsfaktor für aktivierte T- und NK-Zellen, steigert deren lyrische Aktivität und stimuliert die IFN-γ-Sekretion durch ruhende PBMCs.
• Seine Signalübertragung über den IL-12-Rezeptor aktiviert den Jak-Stat-Signalweg und verbindet so angeborene und adaptive Immunität.
• Es handelt sich um ein sekretiertes Glykoprotein mit einem Signalpeptid, einer Immunglobulin-ähnlichen Domäne und Disulfidbrücken, was seine Zytokin-Struktur widerspiegelt.
• Das Maus-Il12b-Gen (Gen-ID: 16160) kodiert für ein 335-Aminosäuren-Vorläuferprotein, wobei das Gewicht des reifen Proteins etwa 38 kDa beträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 23–335 von Maus IL-12 p40 und deckt den größten Teil der extrazellulären Domäne ab; der Antikörper kann sowohl die freie Untereinheit als auch p40 innerhalb von IL-12/IL-23-Heterodimeren erkennen.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten die Permeabilisierungsbedingungen optimiert und der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen.
• Fügen Sie geeignete Isotypenkontrollen hinzu und verwenden Sie aktivierte Maus-Immunzellen (z. B. LPS/IFN-γ-stimulierte Makrophagen oder dendritische Zellen) als positive Kontrollen.
• Da IL-12 p40 sezerniert wird, kann vor der Färbung ein Proteintransportinhibitor (z. B. Brefeldin A) erforderlich sein, um das Zytokin intrazellulär zu halten.

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