Anti-Maus IgM monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, FC, ELISA - P01872

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der konstanten Region der IgM-schweren Kette

• Proteinidentität und Isoformen: Das Ziel ist die konstante schwere Kette des Immunglobulins (Ig mu-Kette), kodiert durch das Ighm-Gen (Alias Igh-6). Sie bildet die konstante Region von IgM-Antikörpern und existiert durch alternatives Spleißen sowohl als sezernierte (sIgM) als auch als membrangebundene (mIgM) Isoform.
• Antigenbindung und Zusammenbau variabler Domänen: In der humoralen Immunität bilden die variablen Domänen einer schweren Kette und einer leichten Kette die Antigenbindungsstelle. Diese Domänen werden durch V-(D)-J-Rearrangement zusammengebaut und durchlaufen nach Antigenexposition eine somatische Hypermutation zur Affinitätsreifung (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Multimerisierung und Polyreaktivität von sezerniertem IgM: sIgM multimerisiert zu Pentameren oder Hexameren für eine hochaffine Antigenbindung. Natürliches sIgM ist polyreaktiv und erkennt konservierte körpereigene und pathogenabgeleitete Strukturen, während immunologisches sIgM antigenspezifisch ist; beide sind für eine effiziente humorale Antwort unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Effektorfunktionen über Fc-Rezeptoren und Komplement: Die Effektorfunktionen von sIgM werden über den hochaffinen Fc-Rezeptor FCMR auf lymphoiden Zellen vermittelt, was IgG-Antworten und Selbsttoleranz fördert, sowie durch die Rekrutierung von C1q zur Aktivierung des klassischen Komplementweges, was die Neutralisierung von Pathogenen und die Phagozytose von apoptotischen Zellen erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Schleimhautimmunität und Transzytose: An Schleimhautoberflächen wird sIgM von PIGR über das Epithel transportiert und mit der sekretorischen Komponente ausgeschüttet. IgM-Antigen-Komplexe können über FCMR retrotranszytotisch über M-Zellen in lymphatische Gewebe transportiert werden. Verwandte Referenzen: PMID:34788614
• Membrangebundenes IgM BCR-Signalisierung: Als Teil des B-Zell-Rezeptor-Komplexes liefert membrangebundenes IgM konstitutive tonische Signalgebung, die für das Überleben von B-Zellen notwendig ist, und vermittelt die prä-BCR-Signalgebung, die die Umlagerung von Immunglobulin-Genen und die allelische Ausschließung reguliert.
• Subzelluläre Lokalisierung und Gewebeexpression: Das Protein befindet sich auf der Zellmembran (als BCR-Komponente) und wird sezerniert. Es wird auf Proteinebene im Knochenmark sowie in B-1- und B-2-Zellen exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen und strukturelle Schlüsselwörter: Charakterisiert durch Disulfidbrücken, N-verknüpfte Glykosylierung, Immunglobulin-Domänen und eine Transmembranhelix (in der membrangebundenen Isoform). Schlüsselwörter: Disulfidbrücke, Glykoprotein, Immunglobulin-Domäne, Membran, sezerniert, Transmembran.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 105-454 von Maus-Ighm (P01872) umspannt und einem Bereich innerhalb der konstanten Domäne entspricht. Dieses Design kann Epitope zielen, die zwischen der sezernierten und der membrangebundenen Isoform konserviert sind, was potenziell die Detektion beider Formen ermöglicht.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht des Ziels unter reduzierenden Bedingungen ca. 50–53 kDa. Ziehen Sie die Verwendung geeigneter Kontrollen, wie Maus-Milzlysate oder gereinigtes IgM, in Betracht und validieren Sie das Bandmuster in Ihrem Probensystem.
• In der Immunhistochemie von Paraffin-eingebetteten Geweben (IHC-P) sollten die optimale Antigen-Retrieval und Antikörperverdünnung experimentell bestimmt werden. Der Antikörper ist für die Verwendung an Mausgeweben bestimmt; Kreuzreaktivitäten mit anderen Spezies wurden nicht berichtet.
• Für die Durchflusszytometrie (FC) stellen Sie sicher, dass eine ordnungsgemäße Fc-Rezeptor-Blockade durchgeführt wird, und verwenden Sie direkt konjugierte oder sekundäre Detektionsreagenzien, die mit dem kaninchen-monoklonalen Format kompatibel sind. Eine Vorvalidierung der Färbung in Maus-B-Lymphozytenpopulationen (z. B. Milzzellen) wird empfohlen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Capture oder Nachweis von Maus-IgM verwendet werden. Erwägen Sie die Kombination mit einem geeigneten Detektionsantikörper für Sandwich-ELISA-Setups und validieren Sie die Empfindlichkeit und Spezifität des Assays.

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