Anti-Maus F4/80 monoklonaler Antikörper (Biotin) für Durchflusszytometrie – Q61549

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von F4/80

• F4/80 (Adgre1, Emr1) ist die adhäsive G-Protein-gekoppelte Rezeptor E1 der Maus, ein oberflächenständiges Glykoprotein und Mitglied der EGF-TM7-Familie der Klasse-B-GPCRs.
• Es handelt sich um einen Orphan-Rezeptor, der an Zelladhäsion und Zell-Zell-Interaktionen beteiligt ist, insbesondere im Immunsystem; er kann auch eine Rolle bei der Entwicklung regulatorischer T-Zellen (Treg) spielen.
• Bei Mäusen wird F4/80 auf Makrophagen exprimiert, fehlt jedoch in Makrophagen, die in den T-Zell-Bereichen von Lymphknoten und Milz lokalisiert sind; es zeigt eine niedrige Expression auf Blutmonozyten, was es zu einem etablierten Pan-Makrophagenmarker macht.
• Das Protein ist ein Multi-Pass-Transmembranrezeptor, das an der Zellmembran lokalisiert ist.
• Strukturell enthält es EGF-ähnliche Domänen und eine GPCR-Autoproteolyse-induzierende (GAIN)-Domäne; es wird vorausgesagt, dass es mehrere Disulfidbindungen und Glykosylierungsstellen enthält.
• Von UniProtKB zugewiesene Schlüsselwörter umfassen: adaptive Immunität, Kalziumsignalgebung (typisch für GPCRs), Zellmembran, Glykoprotein und Rezeptoraktivität.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Optimieren Sie für die Durchflusszytometrie die Antikörperkonzentration durch Titration unter Verwendung der Zielzellpopulation; typische Anfangsverdünnungen für Biotin-Konjugate variieren stark und müssen experimentell bestimmt werden.
• Die Biotin-Markierung ermöglicht eine flexible Detektion mit Streptavidin-Fluorophor-Konjugaten; stellen Sie sicher, dass das Detektionsreagenz mit Ihrem Panel und Ihrer Laserkonfiguration kompatibel ist.
• Bei der Färbung von Maus-Makrophagen inkubieren Sie vorab mit einem Fc-Rezeptor-Block (z. B. Anti-CD16/CD32), um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• F4/80 ist ein großes Transmembranprotein; wenn Sie Zellen fixieren und permeabilisieren, überprüfen Sie, dass Ihr Protokoll die Erkennung des Oberflächenepitops erhält.
• Da F4/80 in Makrophagen in T-Zell-Bereichen lymphoider Gewebe nicht exprimiert wird, fügen Sie geeignete Positiv- (z. B. Makrophagen der roten Milzpulpa) und Negativkontrollen (z. B. T-Zell-Zone des Lymphknotens) hinzu.

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