Anti-Maus CD8a monoklonaler Antikörper () für die Durchflusszytometrie - P01731

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD8a-Funktion und Lokalisation

• CD8a, auch bekannt als Lyt-2, ist ein T-Zell-Oberflächenglykoprotein und ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie.
• Es fungiert als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle und interagiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor und MHC Klasse I auf antigenpräsentierenden Zellen.
• Nach Antigenerkennung rekrutiert CD8a die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex und initiiert so die intrazelluläre Signalübertragung für T-Zell-Aktivierung, Zytokinproduktion und zytotoxische Antworten.
• In zytotoxischen T-Lymphozyten (CTLs) ermöglicht dieser Mechanismus die Erkennung und Eliminierung infizierter oder Tumorzellen.
• In NK-Zellen fördern CD8A-Homodimere das Überleben und serielle Abtöten von Zielzellen und unterstützen die Differenzierung in Gedächtnis-CD8-T-Zellen.
• Das Protein ist mit einer Einzelpass-Transmembrandomäne an der Zellmembran lokalisiert und enthält eine extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domäne.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Palmitoylierung, die für seine Stabilität und Funktion wichtig sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 28-196), die sich mit der MHC-Klasse-I-Bindungsregion überschneidet; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich das native Oberflächenprotein. Eine Validierung der Bindung an lebenden Zellen durch FC sollte in Betracht gezogen werden.
• Für die Durchflusszytometrie sollte die optimale Antikörperkonzentration an Mauslymphozyten (z.B. Splenozyten oder Thymozyten) als Positivkontrolle titriert werden. Verwenden Sie eine geeignete Isotypenkontrolle.
• Da CD8a ein Transmembranprotein ist, sind Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für die Oberflächenfärbung typischerweise nicht erforderlich, stellen Sie jedoch sicher, dass die Zellen während der Verarbeitung lebensfähig bleiben.
• Bei Verwendung in Kombination mit anderen Fluorophor-konjugierten Antikörpern sollte auf mögliche spektrale Überlappung mit (ähnlich FITC) geachtet werden.

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