Anti-Maus-CD45 monoklonaler Antikörper () für IF/ICC, FC - P06800

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD45-Funktion und -Lokalisierung

• CD45, auch bekannt als Leukozyten-Common-Antigen (L-CA), Ly-5 und T200, ist eine Rezeptor-Tyrosin-Protein-Phosphatase C, die vom Ptprc-Gen in der Maus kodiert wird.
• Es ist essentiell für die T-Zell-Aktivierung; nach Antigenrezeptor-Bindung reguliert CD45 die Koaktivierung positiv über DPP4-Bindung.
• Das Protein enthält zwei tandemartige intrazelluläre Phosphatase-Domänen; die erste Domäne ist katalytisch aktiv, während die zweite die Substratspezifität moduliert (By similarity).
• CD45 dephosphoryliert wichtige Signalmoleküle, einschließlich SKAP1, FYN und LYN, und moduliert dadurch die LYN-Aktivität und das nachgeschaltete TCR-Signaling.
• An der immunologischen Synapse lokalisiert CD45 in Membranrafts und interagiert mit CLEC10A auf dendritischen Zellen, um die Aktivierungsschwellen von T-Zellen fein abzustimmen und Autoimmunität zu verhindern.
• Es existieren mehrere CD45-Isoformen aufgrund alternativen Spleißens mit Molekulargewichten von 130 bis 144 kDa; das Protein ist stark glykosyliert und phosphoryliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC): Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen können die Epitopzugänglichkeit beeinflussen; erwägen Sie, Methanol- versus Paraformaldehyd-Fixierungsprotokolle zu testen.
• Das Immunogen umfasst einen großen Teil der extrazellulären Domäne (aa 26–566), was auf eine potenzielle Erkennung mehrerer CD45-Isoformen hindeutet; validieren Sie bei Bedarf die Isoformenspezifität in Ihrem experimentellen Kontext.
• Für Durchflusszytometrie (FC): Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen, und schließen Sie immer geeignete Isotypenkontrollen ein.
• CD45 wird breit auf allen Leukozyten exprimiert; erwarten Sie daher eine weit verbreitete Färbung in lymphatischem Gewebe und verwenden Sie linien-spezifische Marker für ein präzises Gating von Zellpopulationen.

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