Anti-Maus CD44 monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC - P15379

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD44-Funktion und -Lokalisierung

• Kodiert das CD44-Antigen, auch bekannt als extrazellulärer Matrixrezeptor III (ECMR-III), GP90-Lymphozyten-Homing-/Adhäsionsrezeptor, HUTCH-I, Hermes-Antigen, Hyaluronat-Rezeptor, Lymphozytenantigen 24 (Ly-24) und phagozytisches Glykoprotein 1 (PGP-1/PGP-I). Mehrere Isoformen werden durch alternatives Spleißen erzeugt.
• Fungiert als Zelloberflächenrezeptor, der Zell-Zell-Interaktionen, Adhäsion und Migration vermittelt und es Zellen ermöglicht, die Gewebemikroumgebung zu erfassen und darauf zu reagieren. Beteiligt sich an T-Lymphozyten-Aktivierung, -Rezirkulation und -Homing, Hämatopoese, Entzündung und der Reaktion auf bakterielle Infektionen. Seine extrazelluläre Domäne bindet Komponenten der extrazellulären Matrix wie Hyaluronan, Kollagen, Wachstumsfaktoren, Zytokine und Proteasen, während seine zytoplasmatische Domäne Signalkomplexe mit Rezeptorkinasen, PKN2, RhoGTPasen RAC1 und RHOA, Rho-Kinasen und Phospholipase C assembliert, um die Calcium-Mobilisierung und die Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:25065622 PMID:8343954
• Nach Bindung an den LGALS9-Liganden aktiviert es die LCK-, ERK- und MAPK-Signalwege, um die Aktivierung natürlicher Killerzellen (NK-Zellen) zu stimulieren. Verwandte Referenzen: PMID:37006235
• Lokalisiert hauptsächlich an der Zellmembran und Mikrovilli; eine sekretierte Form wird ebenfalls produziert.
• Unter normalen Bedingungen spezifisch im Darmepithel exprimiert.
• Enthält wichtige posttranslationale Modifikationen einschließlich Disulfidbrücken, Glykosylierung, Phosphorylierung, Sulfatierung und Proteoglykan-Anheftung, die für seine strukturelle und funktionelle Vielfalt entscheidend sind.
• Gehört zu einer Familie von Adhäsionsrezeptoren mit struktureller Homologie und teilt funktionelle Rollen in der Immunüberwachung und Gewebehomöostase.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 23-176 (extrazelluläre Domäne); daher wird erwartet, dass der Antikörper CD44 an der Zelloberfläche erkennt. Bestätigen Sie die Reaktivität mit der/den spezifischen Isoform(en) von Interesse, da alternatives Spleißen Varianten erzeugen kann, denen diese Region fehlt.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie die Zellen mit Paraformaldehyd fixieren und angemessen permeabilisieren. Validieren Sie die Färbung in bekannten CD44-exprimierenden Maus-Zelllinien oder -Geweben (z. B. Darmepithel).
• Für Durchflusszytometrie (FC) titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihren Zelltyp und Versuchsaufbau zu bestimmen. Schließen Sie geeignete Isotypenkontrollen ein.
• Das -Konjugat bietet helle, photostabile Fluoreszenz; vermeiden Sie längere Lichteinwirkung und verwenden Sie es unter den empfohlenen Lagerbedingungen.
• Da CD44 von der Zelloberfläche abgespalten werden kann, bewerten Sie sowohl Oberflächen- als auch intrazelluläre Färbeprotokolle, wenn sekretierte oder internalisierte Formen relevant sind.

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