Monoklonaler Anti-Maus-CD4-Antikörper (PE/Cyanine5) für FC – P06332

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des T-Zell-Oberflächenglykoproteins CD4

• Das T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD4 (auch als L3T4 oder Ly-4 bezeichnet) ist ein integrales Membranglykoprotein, das als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle fungiert und eine entscheidende Rolle bei der T-Zell-Aktivierung und der Immunantwort spielt.
• CD4 interagiert gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse II auf antigenpräsentierenden Zellen und rekrutiert die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex, um intrazelluläre Signalkaskaden einzuleiten, die zur Lymphokinproduktion, Motilität, Adhäsion und Aktivierung von T-Helferzellen führen.
• Neben T-Zellen wird CD4 auch in anderen Immunzellen wie Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen exprimiert, wo es an TCR-/LCK-unabhängigen Signalwegen beteiligt ist, die Differenzierung, Aktivierung, Zytokinexpression und Zellmigration regulieren.
• CD4 ist für die Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus essenziell und kann die Differenzierung von Monozyten zu funktionell reifen Makrophagen auslösen.
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert und weist extrazelluläre immunglobulinähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz auf, der posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Palmitoylierung und N-Glykosylierung unterliegt.
• Die CD4-Expression ist ein Kennzeichen von T-Helferzellen, die auf die Aktivierung zytotoxischer T-Zellen, die Regulierung von B-Zellen und die Stimulierung von Phagozyten spezialisiert sind.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Für Anwendungen in der Durchflusszytometrie (FC) mit diesem PE/Cyanine5-Konjugat sollte der Antikörper titriert werden, um für den jeweiligen Zelltyp und Versuchsaufbau eine optimale Konzentration zu bestimmen, die unspezifische Bindungen minimiert und gleichzeitig die Empfindlichkeit erhält.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (AS 27–394) von Maus-CD4; daher ist zu erwarten, dass der Antikörper an die native Zelloberflächenform bindet. Dennoch sollten Anwender die Reaktivität in ihrem Probensystem validieren, insbesondere bei der Arbeit mit Nicht-T-Zell-Populationen, die möglicherweise geringere CD4-Spiegel exprimieren.
• Den Antikörper vor Licht schützen und wiederholte Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden, um die Stabilität des Konjugats und die Fluoreszenzintensität zu erhalten.
• Die Verwendung geeigneter Isotypkontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsschritte sollte in Betracht gezogen werden, um den Hintergrund in Mausproben zu reduzieren.

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