Anti-Maus CD34 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q64314

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD34-Funktion und Lokalisierung

• CD34 ist ein Typ-I-Membranprotein mit einfacher Transmembrandomäne und Mitglied der Sialomucin-Familie, kodiert durch das Cd34-Gen bei der Maus. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Wirkt als mögliches Adhäsionsmolekül bei der frühen Hämatopoese und vermittelt die Anheftung von Stammzellen an die extrazelluläre Matrix des Knochenmarks oder an Stromazellen. Es kann linien-spezifische Glykane als Gerüst dienen lassen, um Kohlenhydrat-Liganden für Selektine zu präsentieren (nach Ähnlichkeit).
• Die subzelluläre Lokalisierung erfolgt überwiegend an der Zellmembran, was mit seiner Rolle als Transmembranrezeptor übereinstimmt.
• Gewebeexpression: Nachgewiesen in der Niere, insbesondere im dünnen Teil der Henle-Schleife (auf Proteinebene). Hohe Expression in hämatopoetischen Vorläuferzelllinien, Gehirn und Hoden; moderat in Thymus, Milz und Knochenmark; abwesend in der adulten Leber. Zugehörige Referenzen: PMID:31605441 PMID:1709048
• Klassifiziert als Glykoprotein und Phosphoprotein mit einem Signalpeptid und einer einzelnen Transmembranhelix.
• Bekannt für die Beteiligung an Zelladhäsion und Signaltransduktion, was Entscheidungen über das Stammzellschicksal beeinflusst.
• Das Protein ist stark glykosyliert, was zu seinem beobachteten Molekulargewicht von ~41 kDa beiträgt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (AS 35–287), was die Zugänglichkeit für die Durchflusszytometrie lebender Zellen maximiert. Eine Permeabilisierung ist nicht erforderlich.
• Optimieren Sie die Färbung durch Titration des Antikörpers über einen Konzentrationsbereich (z. B. 0,1–5 μg/mL) in Ihrem spezifischen experimentellen System und verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
• Da der Antikörper direkt an konjugiert ist, ist kein sekundärer Antikörper erforderlich, was Hintergrundrauschen und Vorbereitungsschritte reduziert.
• Für die quantitative FC sollten Kalibrierungs-Beads in Betracht gezogen werden, um die Fluoreszenzintensität in Moleküle äquivalenter löslicher Fluorochrome (MESF) umzurechnen.
• Die Antigendichte kann je nach Zelltyp variieren; validieren Sie den Antikörper an bekannten positiven (z. B. hämatopoetischen Vorläuferzellen) und negativen Populationen.

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