Anti-Mouse CD28 Monoklonaler Antikörper () für Durchflusszytometrie - P31041

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD28-Funktion und -Lokalisierung

• CD28 ist ein T-Zell-spezifisches Oberflächenglykoprotein, das als kostimulatorischer Rezeptor fungiert, der für die T-Zell-Aktivierung, -Proliferation und das Überleben unerlässlich ist und so die Immunhomöostase aufrechterhält. Verwandte Referenzen: PMID:7688139

• Bei Bindung an seine Liganden CD80 (B7-1) oder CD86 (B7-2) verstärkt CD28 T-Zell-Rezeptor (TCR)-Signale und liefert einzigartige Signale, die das Genexpressionsprogramm der T-Zellen verändern, was zu einer erhöhten Proliferation und Zytokinproduktion (z. B. IL-2) in sowohl CD4+- als auch CD8+-T-Zell-Subsets führt.

• Die Verknüpfung von CD28 rekrutiert Proteinkinase C-theta (PRKCQ) und GRB2, was zur Aktivierung von NF-kappa-B durch sowohl PI3K/Akt-abhängige als auch -unabhängige Wege führt.

• In Verbindung mit TCR/CD3-Verknüpfung und CD40L-Kostimulation verstärkt CD28 die Produktion von IL-4 und IL-10 in T-Zellen.

• CD28 ist in der Zellmembran lokalisiert und enthält eine einzelne Transmembranhelix, mit einer extrazellulären Immunglobulin-ähnlichen Domäne und einem zytoplasmatischen Schwanz, der an der Signalübertragung beteiligt ist.

• Das Protein wird posttranslational durch Glykosylierung und Phosphorylierung modifiziert und verfügt über eine Disulfidbrücke, die seine Immunglobulin-Domäne stabilisiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Fügen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Fluoreszenz-minus-eins (FMO)-Kontrollen hinzu, um eine spezifische Färbung sicherzustellen.
• Das Immunogen (Aminosäuren 20-149) entspricht der extrazellulären Domäne, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die native Konformation erkennen kann; validieren Sie dies jedoch im entsprechenden Probensystem.
• Erwägen Sie Protokolle zur Zelloberflächenfärbung mit Lebend/Tot-Unterscheidung für eine genaue Analyse von T-Zell-Subsets.

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