Anti-Maus CD272/BTLA monoklonaler Antikörper () für Durchflusszytometrie - Q7TSA3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD272/BTLA-Funktion und -Lokalisierung

• CD272 (BTLA) ist ein B- und T-Lymphozyten-Attenuator, ein hemmender Rezeptor, der zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Er enthält eine extrazelluläre Immunglobulin-Domäne, eine transmembrane Helix und einen zytoplasmatischen Schwanz mit immunrezeptor-tyrosinbasierten Hemmmotiven (ITIMs).
• BTLA reguliert die Antigenrezeptor-Signalisierung in Lymphozyten negativ durch Rekrutierung der Proteintyrosin-Phosphatasen SHP-1 und SHP-2. Verwandte Referenzen: PMID:12796776 PMID:14652006
• Es interagiert mit TNFRSF14 (HVEM) in cis (auf derselben Zelle) oder in trans (zwischen Zellen). Cis-Interaktionen halten einen Ruhezustand in naiven T-Zellen aufrecht, während Trans-Interaktionen Überlebenssignale an Effektor-T-Zellen während der adaptiven Immunantwort liefern. Verwandte Referenzen: PMID:1990044
• Wird in Milz-T- und -B-Zellen, Lymphknotengeweben sowie auch in Makrophagen, NK-Zellen und dendritischen Zellen exprimiert. Eine polymorphe Gewebeverteilung wird zwischen verschiedenen Mausstämmen beobachtet.
• Das Protein befindet sich an der Zellmembran als Single-Pass-Typ-I-Membranprotein, wobei ein N-terminales Signalpeptid während der Verarbeitung gespalten wird.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung, und seine Struktur enthält Disulfidbrücken, die für die Stabilität der Immunglobulin-Domäne wichtig sind.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, obwohl die funktionelle Bedeutung bei der Maus nicht vollständig charakterisiert ist.
• Breit an der adaptiven Immunität beteiligt, mit verfügbaren dreidimensionalen Strukturdaten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper ist direkt an konjugiert, einen roten Fluoreszenzfarbstoff, geeignet für die durchflusszytometrische Detektion. Erwägen Sie eine Titrierung des Antikörpers, um die optimale Färbekonzentration für Ihr experimentelles System zu bestimmen.
• Erzeugt gegen die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 30-176), erkennt er wahrscheinlich den nativen Zelloberflächenrezeptor. Fügen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen hinzu, um die Spezifität sicherzustellen.
• Um Immunzellen zu färben, kombinieren Sie ihn mit Linienmarkern, um spezifische Populationen auszugaten (z. B. T-Zellen, B-Zellen, NK-Zellen).
• Standardprotokolle für die Durchflusszytometrie-Färbung (z. B. 30 min bei 4 °C) sind anwendbar, validieren Sie jedoch Fixierungsschritte, da diese die Epitoperkennung beeinträchtigen können.
• Als monoklonaler Kaninchen-Antikörper kann er bei Bedarf mit einem Anti-Kaninchen-IgG-Sekundärreagenz nachgewiesen werden, obwohl die direkte Konjugation diesen Schritt überflüssig macht.

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