Monoklonaler Antikörper gegen CD223/LAG-3 der Maus für FC - Q61790

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Proteins des Lymphozytenaktivierungs-Gens 3

• LAG-3 fungiert als inhibitorischer Rezeptor auf antigenaktivierten T-Zellen und übermittelt bei der Bindung an seine Liganden MHC-Klasse II auf antigenpräsentierenden Zellen sowie FGL1, das von Hepatozyten und Tumorzellen sezerniert wird, supprimierende Signale. Zugehörige Referenzen: PMID:12209638, PMID:12421911, PMID:12672063, PMID:30349037
• Die Ligandenbindung induziert die Ubiquitinierung des KIEELE-Motivs, setzt das RRFSALE-Motiv frei und fördert die Bildung von Kondensaten mit der TCR-Komponente CD3E. Dadurch wird die Verbindung zwischen CD3E und LCK gestört und die TCR-Signalübertragung gehemmt. Zugehörige Referenzen: PMID:40101708, PMID:40592325
• LAG-3 kann synergistisch mit PD-1/PDCD1 wirken, um die antigen-spezifische Aktivierung von T-Zellen zu hemmen. Zugehörige Referenz: PMID:21300912
• Es reguliert die Proliferation, Aktivierung, Effektorfunktionen und Homöostase sowohl von CD8+- als auch von CD4+-T-Zellen negativ. Zugehörige Referenzen: PMID:12209638, PMID:12421911, PMID:12672063
• LAG-3 wird konstitutiv auf einer Untergruppe regulatorischer T-Zellen (Tregs) exprimiert, trägt zu deren supprimierender Funktion bei und wirkt außerdem als negativer Regulator der Aktivierung plasmazytoider dendritischer Zellen (pDCs). Zugehörige Referenzen: PMID:15485628, PMID:19201841
• Der inhibitorische LAG-3-Signalweg wird von Tumoren genutzt, um die Antitumorimmunität abzuschwächen, was seine Rolle als Zielstruktur eines Immun-Checkpoints hervorhebt.
• Die Expression erfolgt hauptsächlich in aktivierten CD4+- und CD8+-T-Zellen sowie zusätzlich in einer Untergruppe von Tregs und pDCs. Zugehörige Referenzen: PMID:12209638, PMID:15485628, PMID:19201841
• LAG-3 befindet sich in der Zellmembran und kann auch sezerniert werden.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Bei der Verwendung dieses -konjugierten Antikörpers für die Durchflusszytometrie sollte eine Titration an aktivierten Milzzellen der Maus oder an T-Zelllinien durchgeführt werden, um die optimalen Färbekonzentrationen zu bestimmen.
• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (AS 24–442), wodurch die Erkennung des nativen Rezeptors gewährleistet sein kann; überprüfen Sie die Leistung an lebenden, nicht fixierten Zellen.
• Da LAG-3 ein Aktivierungsmarker ist, kann vor der Analyse eine In-vitro-Stimulation der T-Zellen, beispielsweise mit Anti-CD3/CD28, erforderlich sein, um die Expression hochzuregulieren.
• Bei der intrazellulären Färbung sollte die Kompatibilität mit Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokollen überprüft werden, da der Fluorophor gegenüber bestimmten Puffern empfindlich sein kann.
• Geeignete Isotypkontrollen sollten eingeschlossen werden. Bei Multiplexing sollte außerdem auf mögliche Kompensationsprobleme mit dem ABflo®-647-Farbstoff geachtet werden.

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