Anti-Maus CD22 monoklonaler Antikörper () für IF-P, FC - P35329

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des B-Zell-Rezeptors CD22

• CD22, auch bekannt als Siglec-2 und B-Lymphozyten-Zelladhäsionsmolekül (BL-CAM), ist ein Sialinsäure-bindendes Immunglobulin-ähnliches Lektin, das überwiegend auf B-Zellen exprimiert wird.
• Es fungiert als inhibitorischer Korezeptor auf der Oberfläche von B-Zellen und moduliert das B-Zellrezeptor(BCR)-Signal negativ, indem es die Kalziummobilisation und zelluläre Aktivierung hemmt. Bei starken inhibitorischen Signalen kann es Apoptose induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:7533044 PMID:9016707
• Mechanistisch wird das Immunorezeptor-Tyrosin-basierte inhibitorische Motiv (ITIM) durch die Src-Kinase LYN phosphoryliert, was zur Rekrutierung der Protein-Tyrosinphosphatase PTPN6/SHP-1 führt, die nachgeschaltete Signale dämpft. Verwandte Referenzen: PMID:9016707
• CD22 bindet alpha-2,6-verknüpfte Sialinsäurereste an Oberflächenmolekülen wie CD22 selbst, CD45 und IgM in cis und kann auch Zelladhäsion über trans-Interaktionen mit Liganden auf anderen Zellen vermitteln.
• Das Protein ist spezifisch an der Zellmembran lokalisiert und wird in B-Lymphozyten-Linien exprimiert.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, die zu unterschiedlichen Molekulargewichten beitragen (z. B. 89 kDa, 93 kDa, 97 kDa).
• CD22 ist ein Glykoprotein und Phosphoprotein, wobei N-Glykosylierung und Tyrosinphosphorylierung eine kritische Rolle für seine Funktion spielen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aa 22-151), wodurch dieser Antikörper für den Nachweis von oberflächenständigem CD22 in Immunfluoreszenz und Durchflusszytometrie geeignet ist. Bei der Zielrichtung von Oberflächenepitopen ist eine minimale Permeabilisierung sicherzustellen.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper auf Maus-B-Zelllinien oder primären Milzzellen, um die optimale Konzentration zu bestimmen, und verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen.
• ist ein heller und photostabiles Farbstoff im fernen Rotbereich; vermeiden Sie längere Lichteinwirkung und verwenden Sie geeignete Filtersätze (z. B. 633 nm Anregung, 660 nm Emission).
• Erwägen Sie die Fixierung von Zellen mit 4% PFA für IF-P; bei gleichzeitiger Co-Färbung validieren Sie die Fixierungskompatibilität mit anderen Antikörpern.
• Kreuzreaktivität ist für Maus angegeben; überprüfen Sie die Reaktivität im relevanten Probesystem, wenn Sie den Antikörper bei anderen Spezies einsetzen.

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