Anti-Maus CD140b/PDGFR beta monoklonaler Antikörper (PE) für die Durchflusszytometrie - P05622

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD140b/PDGFR beta Funktion und Lokalisierung

• PDGFRB (auch bekannt als CD140b, PDGFR-1) ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase, der an plättchenabgeleitete Wachstumsfaktor (PDGF)-Liganden bindet, einschließlich PDGFB, PDGFD und PDGFA/PDGFB-Heterodimeren, und ist grundlegend für die embryonale Entwicklung, Zellproliferation, Überleben, Differenzierung, Chemotaxis und Migration.
• Der Rezeptor spielt eine entscheidende Rolle bei der Blutgefäßentwicklung, indem er die Proliferation, Migration und Rekrutierung von Perizyten und vaskulären glatten Muskelzellen zu Endothelzellen fördert; er ist essentiell für die normale Bildung des kardiovaskulären Systems und die Verzweigung der glomerulären Kapillaren in der Niere.
• PDGFRB gehört zur PDGF-Rezeptorfamilie und kann Homodimere oder Heterodimere mit PDGFRA bilden, wobei die Signalausgänge durch Ligandenspezifität und Rezeptordimer-Zusammensetzung moduliert werden.
• Nach Ligandenbindung aktiviert PDGFRB mehrere nachgeschaltete Signalkaskaden, einschließlich der PLCG1-, PI3K-AKT- und RAS-MAPK-Wege, was zu zytoskelettalen Umordnungen, Membranaufrauhungen und transkriptionellen Antworten führt.
• Der Rezeptor befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran, lokalisiert aber nach Internalisierung auch in zytoplasmatischen Vesikeln und dem lysosomalen Lumen, was zur Signalabschwächung beiträgt.
• PDGFRB unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Autophosphorylierung an mehreren Tyrosinresten, N-gebundener Glykosylierung und Ubiquitinierung; er enthält Immunglobulin-ähnliche Domänen, eine Kinase-Insertion und eine gespaltene Tyrosinkinase-Domäne.
• In adulten Geweben wird PDGFRB schwach in glomerulären Mesangiumzellen und interstitiellen Zellen exprimiert, aber seine Expression ist bei renaler Fibrose deutlich hochreguliert, was auf eine Rolle im Fortschreiten fibrotischer Erkrankungen hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 32-530) entspricht, erkennt der Antikörper wahrscheinlich den nativen, oberflächenexponierten Rezeptor, was ihn für die Durchflusszytometrie an lebenden, nicht permeabilisierten Zellen geeignet macht.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu bestimmen; ziehen Sie die Verwendung geeigneter Isotypenkontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierung in Betracht, um unspezifische Bindung zu minimieren.
• Der Antikörper ist für Maus validiert; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet; bei Verwendung in anderen Modellsystemen validieren Sie durch Vergleich mit bekannter Maus-PDGFRB-Expression.
• PDGFRB ist ein 123 kDa Protein; sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Kompensation bei der Verwendung von PE-konjugierten Antikörpern in Mehrfarben-Durchfluss-Panels, da PE ein heller Fluorophor ist.
• Erwägen Sie die Verwendung enzymatischer oder nicht-enzymatischer Zell-Dissoziationsmethoden, die Oberflächenepitope erhalten, da Trypsinierung den Rezeptor spalten und die Färbeintensität verringern kann.

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