Anti-MMP2 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB und ELISA - P08253

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP2-Funktion und -Lokalisierung

• MMP2, auch bekannt als 72 kDa Typ IV Kollagenase, Gelatinase A und CLG4A, ist ein ubiquitär exprimiertes Matrix-Metalloproteinase, das eine kritische Rolle beim Abbau der extrazellulären Matrix und beim Gewebeerneuerung spielt.
• Zu den Kernfunktionen gehören der Umbau der Gefäße, die Förderung der Angiogenese, die Unterstützung der Gewebereparatur, Tumorinvasion und -metastasierung, Entzündungen und das Platzen atherosklerotischer Plaques. Es verarbeitet auch Nicht-Matrix-Substrate wie Big-Endothelin-1 und β-Typ-CGRP, fördert die Vasokonstriktion und spaltet KISS an einer Gly-Leu-Bindung.
• Die C-terminale PEX-Domäne entfaltet anti-angiogene und anti-tumorale Aktivitäten, indem sie die Zellmigration und Adhäsion an FGF2 und Vitronectin hemmt und als Ligand für das Integrin αvβ3 an Blutgefäßen wirkt.
• MMP2 vermittelt die Proteolyse von CHUK/IKKA und löst eine primäre angeborene Immunantwort über mitochondriale-nukleäre Stresssignale und die Aktivierung der NF-κB-, NFAT- und IRF-Transkriptionswege aus.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehört die Sekretion in den extrazellulären Raum/die Matrix sowie das Vorhandensein in der Membran, im Zellkern, Zytoplasma und in den Mitochondrien.
• MMP2 wird von normalen Hautfibroblasten produziert, und sein PEX-Fragment ist in verschiedenen Tumoren exprimiert, einschließlich Gliomen, Brust- und Prostatakrebs.
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen ein Signalpeptid, ein Propeptid (Zymogenform), eine katalytische Domäne mit Zinkbindungsstelle, eine Fibronectin-Typ-II-Domäne und eine hämopexinähnliche C-terminale Domäne; es unterliegt einer autokatalytischen Spaltung und mehreren Phosphorylierungsmodifikationen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umspannt die C-terminale hämopexinähnliche Domäne (aa 451–660), die unter den MMP-Familienmitgliedern einzigartig für MMP2 ist; es wird erwartet, dass dieser Bereich die Zielspezifität in Western-Blot- und ELISA-Anwendungen verleiht.
• Für den Western-Blot von MMP2 sollten Sie geeignete positive Kontrollen einbeziehen (z. B. Lysate aus menschlichen, murinen oder rattengeweblichen Zellen, die bekanntermaßen MMP2 exprimieren, wie Fibroblasten oder Tumorzelllinien) und reduzierende Bedingungen verwenden, um die ~74 kDa Pro-Form und die ~64 kDa aktive Form zu detektieren.
• Im ELISA kann dieser Antikörper mit einem geeigneten Detektionsantikörper (z. B. einem anderen Klon, der ein anderes Epitop erkennt) für Sandwich-Formate gepaart werden; eine Vorvalidierung des Antikörperpaars in der relevanten Probenmatrix wird empfohlen.
• Da MMP2 sezerniert wird, sollten Sie in Betracht ziehen, konditioniertes Medium oder serumfreie Kulturüberstände herzustellen, um das Protein anzureichern, insbesondere wenn Sie endogene Spiegel in Proben mit geringer Häufigkeit untersuchen.

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