Anti-MMP14/MT1-MMP Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50281

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP14/MT1-MMP Funktion und Lokalisierung

• Die Matrixmetalloproteinase-14 (MMP14), auch als MT1-MMP bezeichnet, ist eine membranständige Metalloproteinase, die als Zymogen synthetisiert wird und eine proteolytische Spaltung für die Aktivierung erfordert. Sie enthält charakteristische Disulfidbrücken sowie Calcium- und Zinkbindungsstellen und wird durch Phosphorylierung reguliert.
• Als Endopeptidase baut MMP14 verschiedene Komponenten der extrazellulären Matrix ab, insbesondere Kollagen, und ist für die perizelluläre Kollagenolyse und das Remodeling von Bindegewebe unerlässlich (PubMed:8015608).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:8015608
• MMP14 aktiviert Pro-Gelatinase A (pro-MMP2) durch proteolytische Spaltung und fungiert somit als positiver Regulator des Zellwachstums und der Zellmigration. Sie trägt auch zusammen mit pro-MMP2 zur Bildung von fibrovaskulärem Gewebe bei (PubMed:22065321, PubMed:12714657).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22065321
  PMID:12714657
• Das Enzym wirkt als Regulator des Notch-Signalwegs, indem es die Spaltung und Hemmung des Liganden DLL1 vermittelt (PubMed:21572390).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:21572390
• MMP14 spaltet ADGRB1, um Vasculostatin-40 freizusetzen, einen Angiogenese-Hemmer, und spaltet und inaktiviert zudem den GDF15-Rezeptor GFRAL, wodurch die GDF15-GFRAL-Aversionsreaktion moduliert wird (PubMed:22330140, PubMed:35177851).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22330140
  PMID:35177851
• Die Lokalisierung erfolgt primär an der Zellmembran, aber MMP14 wird auch in Melanosomen und im Zytoplasma nachgewiesen, was seiner Rolle bei der perizellulären Proteolyse und der intrazellulären Signalgebung entspricht.
• Die Expression ist prominent in Stromazellen von Dickdarm, Brust und Kopf sowie Hals sowie in Lungentumoren zu beobachten, was ihrer Funktion beim Remodeling der Tumormikroumgebung entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 75–174 innerhalb der extrazellulären Domäne von humanem MMP14 entspricht, einer Region, die bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist – dies stimmt mit der berichteten Kreuzreaktivität überein.
• Für Western Blots läuft das Pro-Enzym bei etwa 66 kDa; aktive, verarbeitete Formen können bei niedrigeren Molekulargewichten auftreten. Validieren Sie die Bandenmuster mit entsprechenden Zell- oder Gewebelysaten (z. B. HT‑1080 Fibrosarkomzellen, Plazentagewebe).
• In der Immunhistochemie (IHC‑P) kann eine Antigen-Retrieval notwendig sein; testen Sie an Paraffin-eingebetteten Schnitten von Dickdarm-, Brust- oder Lungentumorproben. Eine Stromafärbung wird erwartet.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung erforderlich, um zytoplasmatisches und membranständiges MMP14 nachzuweisen. Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte eine Paarung mit einem Capture-Antikörper gegen ein anderes Epitop in Betracht gezogen werden; die polyklonale Natur des Antikörpers kann ein robustes Signal bieten, wenn er als Detektor verwendet wird.
• Wie bei allen polyklonalen Antikörpern sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz im beabsichtigten Testsystem überprüft werden.

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