Anti-MMP13 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P45452

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP13-Funktion und -Lokalisierung

• Kollagenase 3 (MMP-13) ist eine sekretierte Matrixmetalloproteinase, die durch das MMP13-Gen kodiert wird, mit einer vorhergesagten molekularen Masse von 53,8 kDa und einer beobachteten Bande von ~54 kDa im Western Blot.
• Sie spaltet hauptsächlich dreisträngige fibrilläre Kollagene und zeigt die höchste Aktivität gegenüber löslichem Typ-II-Kollagen, baut aber auch die Typen I, III, IV, X und XIV sowie Fibronectin und Tenascin ab.
• MMP13 gehört zur zink- und kalziumabhängigen Metalloprotease-Familie; sie benötigt Kalzium für die Stabilität und enthält konservierte Domänen, die typisch für MMPs sind.
• Das Enzym wird in den extrazellulären Raum und die Matrix sezerniert, wo es seine katalytischen Funktionen ausübt.
• Die Expression wird in fetalem Knorpel, hypertrophen Chondrozyten, Osteoblasten, periostalen Zellen und aktivierten T-Lymphozyten nachgewiesen; sie ist auch in Brustkrebsgewebe zu finden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Glykosylierung; das Zymogen enthält ein Signalpeptid und konservierte Disulfidbindungen.
• MMP13 ist essentiell für die normale embryonale Knochenentwicklung, die Skelettverknöcherung und die Heilung von Knochenbrüchen; sie fördert auch die Migration von Keratinozyten bei der Wundheilung und kann die Invasion von Tumorzellen erleichtern.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Resten 350–450 von humanem MMP13 entspricht, was in einer Region liegt, die wahrscheinlich im aktiven Enzym konserviert ist.
• Für den Western Blot wird typischerweise eine einzelne Bande nahe 54 kDa unter reduzierenden Bedingungen beobachtet; validieren Sie die Expression in geeigneten Zelllinien oder Gewebelysata.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC wird ein Signal in der extrazellulären Matrix und im sekretorischen Weg erwartet; erwägen Sie eine Co-Färbung mit Organellmarkern.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise die Paarung mit einem geeigneten Fangantikörper; testen Sie die Linearität mit rekombinanten MMP13-Standards.
• Da MMP13 ein sekretiertes Protein ist, sind Zellkulturüberstände oder Gewebeextrakte geeignete Probentypen.

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