Anti-MMP12 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P39900

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP12-Funktion und -Lokalisierung

• Makrophagen-Metalloelastase (MMP-12, auch bekannt als ME, HME, MMP12) ist eine sekretierte Matrixmetalloproteinase, die zur Familie der zinkabhängigen Endopeptidasen gehört.
• MMP-12 zeigt eine signifikante elastolytische Aktivität und ist an Gewebeverletzung und -remodellierung beteiligt, mit einer Präferenz für Leucin an der P1'-Stelle und aromatische/hydrophobe Reste an P1.
• Das Enzym wird hauptsächlich in alveolären Makrophagen exprimiert und nicht in peripheren Blutmonozyten nachgewiesen, was seine Rolle bei der Lungengewebe-Homöostase und Entzündung unterstreicht.
• Subzellulär wird MMP-12 in den extrazellulären Raum sezerniert und lokalisiert sich in der extrazellulären Matrix, wo es Elastin und andere Matrixkomponenten abbaut.
• Als Mitglied der MMP-Familie enthält es charakteristische Domänen, einschließlich eines Pro-Peptids, das die Latenz erhält (Zymogenform), und benötigt Calcium- und Zinkionen für die Aktivität.
• Strukturelle Merkmale umfassen Disulfidbrücken und Glykosylierung, wie durch UniProt-Schlüsselwörter angegeben; eine 3D-Struktur wurde bestimmt.
• Das全长-Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~54 kDa (berechnet 54002 Da), was der bei Western Blots beobachteten Bande entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen war ein synthetisches Peptid, das den Resten 200-300 von humanem MMP-12 (NP_002417.2) entspricht. Bei der Versuchsplanung sollten Sie berücksichtigen, dass diese Region innerhalb der katalytischen Domäne liegt und sowohl die Pro- als auch die aktiven Formen erkennen kann, aber nicht mit dem Signalpeptid überlappt.
• Für Western Blots liegt das vorhergesagte Molekulargewicht bei ca. 54 kDa; Glykosylierung kann jedoch zu leichten Verschiebungen der Wanderung führen. Validieren Sie die beobachtete Bandengröße in Ihrem spezifischen Probensystem.
• Bei IF/ICC wird MMP-12 sezerniert, daher sollten Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen optimiert werden, um das mit der extrazellulären Matrix verbundene Signal zu erhalten. Eine Co-Färbung mit Makrophagenmarkern kann helfen, die Spezifität in Gewebeschnitten zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen werden rekombinantes MMP-12 oder gereinigte Proteinstandards empfohlen, um Standardkurven zu erstellen und die Antikörper-Bindungseffizienz zu bewerten.

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