Anti-MMP10 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09238

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP10-Funktion und -Lokalisierung

• MMP10 (Stromelysin-2) ist auch bekannt als Matrix-Metalloproteinase-10 (MMP-10) oder Transin-2, kodiert durch das MMP10-Gen.
• Es ist eine sekretierte, zinkabhängige Endopeptidase, die verschiedene Komponenten der extrazellulären Matrix abbaut, einschließlich Fibronectin, Gelatine der Typen I, III, IV und V sowie schwach Kollagene III, IV und V.
• MMP10 kann Prokollagenase aktivieren und nimmt so an der proteolytischen Kaskade teil, die die extrazelluläre Matrix umgestaltet.
• Als Mitglied der Matrix-Metalloproteinase-Familie teilt es strukturelle Merkmale wie ein Signalpeptid, eine Propeptid-Domäne und eine katalytische Domäne mit konservierten Zinkbindungs- und Kalziumbindungsstellen.
• Subzellulär wird MMP10 in den extrazellulären Raum sezerniert und lokalisiert sich in der extrazellulären Matrix, was seiner Rolle beim Matrixumsatz entspricht.
• Das Enzym wird als inaktives Zymogen synthetisiert und erfordert eine proteolytische Spaltung zur Aktivierung, ein für MMPs typischer Regulationsmechanismus.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbrücken, und das Protein enthält charakteristische Wiederholungsstrukturen und Metallbindungsmotive, die für seine hydrolytische Aktivität essentiell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich innerhalb des reifen Proteins (Aminosäuren 237–476), der sowohl die Pro-Form als auch das aktive Enzym ohne Vorliebe erkennen kann. Validieren Sie dies in Ihrem Modellsystem, wenn eine nachweisform-spezifische Erkennung erforderlich ist.
• Für Western Blots erwarten Sie ein Band bei ca. 54 kDa (Vorläufer) oder etwas niedriger für die reife Form nach der Aktivierung; reduzierende Bedingungen werden empfohlen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval mittels wärmevermittelter Citrat- oder EDTA-Puffer das Signal verstärken; die Gewebeexpressionsniveaus können variieren, daher sind geeignete Kontrollen unerlässlich.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, da MMP10 sezerniert wird und möglicherweise einen Golgi-Blockierungsagenten erfordert, um den intrazellulären Verbleib zu verbessern.
• Bei Verwendung in ELISA kann die polyklonale Natur eine empfindliche Erfassung/Detektion bieten, aber die Kreuzreaktivität mit anderen MMPs sollte aufgrund der Sequenzhomologie innerhalb der Familie bewertet werden.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; Es ist ratsam, jede neue Charge zu titrieren und die Reaktivität über die beabsichtigten Spezies (Mensch, Maus, Ratte) zu bestätigen.

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