Anti-MMP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P03956

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MMP1-Funktion und -Lokalisierung

• MMP1 (interstitielle Kollagenase oder Fibroblasten-Kollagenase) ist ein Mitglied der Matrix-Metalloproteinase-Familie, das Kollagene I, II und III an einer einzelnen helikalen Stelle spaltet sowie Kollagene VII und X.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:1645757 PMID:2153297 PMID:2557822

• Während einer HIV-Infektion interagiert MMP1 mit dem sezernierten viralen Tat-Protein und spaltet es, wodurch die Tat-vermittelte Neurotoxizität reduziert wird.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:16807369

• Wird als inaktives Zymogen (pro-MMP1) synthetisiert; die Aktivierung erfordert die autokatalytische Spaltung des Propeptids, die durch den Cystein-Switch und das Zink-Bindungsmotiv reguliert wird.

• Das sezernierte Enzym lokalisiert sich im extrazellulären Raum und in der extrazellulären Matrix, wo es den Kollagenabbau und das Geweberemodelling vermittelt.

• Strukturell besitzt MMP1 ein Signalpeptid, ein Propeptid, eine katalytische Domäne mit einer Zinkbindungsstelle und eine Hämopexin-ähnliche Domäne; es ist ein Glykoprotein mit stabilisierenden Disulfidbrücken.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und möglicherweise Glykosylierung, was die enzymatische Aktivität und extrazelluläre Wechselwirkungen beeinflussen kann.

• Das humane MMP1-Gen kodiert für ein Protein mit einem berechneten Molekulargewicht von ca. 54 kDa, das als kalziumabhängige Metalloprotease wirkt.

• MMP1 beteiligt sich am Turnover der extrazellulären Matrix und trägt zu Prozessen wie Wundheilung, embryonaler Entwicklung und pathologischer Matrixzerstörung bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 20-280) umspannt die Propeptid- und die katalytische Domäne und erkennt potenziell sowohl die Pro- als auch die aktive MMP1-Form, was es für den Nachweis des Gesamt-MMP1 im WB geeignet macht.
• Unter reduzierenden WB-Bedingungen können die Pro-Form (~54 kDa) und die aktive Form (~44 kDa) aufgelöst werden; validieren Sie die Bandengrößen mit geeigneten Kontrollen.
• Für ELISA sollten Sie diesen Antikörper mit einem monoklonalen Capture-Antikörper kombinieren, der ein anderes Epitop anzielt, um die Spezifität zu erhöhen; testen Sie die Kreuzreaktivität in der relevanten Probenmatrix.
• Zellkulturüberstände oder Gewebshomogenate werden als empfohlene Probentypen angesehen; für den intrazellulären Nachweis kann ein Sekretionsinhibitor (z. B. Brefeldin A) das Signal verbessern.
• Verwenden Sie positive Kontrollen (z. B. PMA-stimulierte Fibroblasten) und negative Kontrollen, um die MMP1-Induktion und die Antikörperspezifität zu bestätigen.

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