Anti-MLL5/KMT2E Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – Q8IZD2

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MLL5/KMT2E

• MLL5, auch bekannt als Histon-Leser KMT2E, ist eine inaktive Histon-Lysin-N-Methyltransferase 2E, die als chromatinassoziierter Regulator wirkt. Es bindet trimethyliertes Histon H3 an Lys-4 (H3K4me3) über seine PHD-Finger-Domäne und vermittelt die Chromatininteraktion stromabwärts von Transkriptionsstartstellen aktiver Gene. Verwandte Referenzen: PMID:23798402 PMID:24130829

• Es spielt eine Schlüsselrolle bei der Hämatopoese und reguliert die terminale myeloische Differenzierung sowie die Selbsterneuerung hämatopoetischer Stammzellen über einen Mechanismus, der DNA-Methylierung beinhaltet (Nach Ähnlichkeit).

• MLL5 beteiligt sich an der Regulation des Zellzyklus in mehreren Stadien, einschließlich des G1/S-Übergangs, der S-Phasenprogression und des Eintritts in die Mitose. Es wird durch HCFC1 an E2F1-responsive Promotoren rekrutiert, wo es H3K4me3 und die transkriptionelle Aktivierung stimuliert und den Übergang von der G1- zur S-Phase erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:14718661 PMID:18573682 PMID:19264965 PMID:23629655

• Die Isoform NKp44L fungiert als zellulärer Ligand für den natürlichen Zytotoxizitätsrezeptor NCR2/NKp44 und wirkt möglicherweise als Gefahrensignal bei der NK-Zell-vermittelten angeborenen Immunität.

• Subzellulär lokalisiert sich MLL5 im Kern (Nukleoplasma und kernige Speckel), kann aber je nach Isoform und zellulärem Kontext auch im Zytoplasma, am Zentrosom und an der Zellmembran gefunden werden.

• Das Protein wird weithin sowohl in erwachsenen als auch in fötalen Geweben exprimiert, mit den höchsten Werten im fötalen Thymus und Nieren sowie in hämatopoetischen Geweben von Erwachsenen, Jejunum und Kleinhirn. Die Isoform NKp44L wird nicht auf gesunden zirkulierenden Zellen nachgewiesen, sondern auf vielen Tumor- und transformierten Zelllinien exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:12101424 PMID:23958951

• Strukturell verfügt MLL5 über eine SET-Domäne (inaktive Methyltransferase), eine PHD-Finger und coiled-coil-Regionen und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 200–500 ab, eine Region, die die PHD-Finger-Domäne enthält. Dieser Antikörper kann besonders geeignet sein, um chromatingebundenes MLL5 in ChIP-bezogenen Anwendungen nachzuweisen, falls er angepasst wird.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~205 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten. Validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen, da mehrere Isoformen existieren.
• Bei Immunfluoreszenz und Immunhistochemie kann MLL5 je nach Zelltyp und Fixierung Färbemuster mit kernigen Speckeln oder Zentrosomen aufweisen. Fügen Sie Permeabilisierungsschritte und Ko-Färbung mit Organellenmarkern hinzu.
• Für ELISA verwenden Sie das rekombinante Proteinimmunogen als positives Beschichtungsantigen, um die Assay-Bedingungen zu etablieren. Die Kreuzreaktivität mit murine und Ratten-MLL5 ermöglicht möglicherweise Tests mit mehreren Spezies.

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