Anti-MLF1 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P58340

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MLF1

• MLF1 (Myeloischer Leukämiefaktor 1) ist ein Protein, das an der Festlegung der Zelllinie primärer hämatopoetischer Vorläuferzellen beteiligt ist, die Bildung erythroider Zellen einschränkt und gleichzeitig die myeloische Bildung fördert. Es beeinträchtigt die durch Erythropoetin induzierte terminale erythroide Differenzierung, indem es den Austritt aus dem Zellzyklus durch Unterdrückung der CDKN1B/p27Kip1-Spiegel verhindert.
• MLF1 unterdrückt die COP1-Aktivität über CSN3, was zur Aktivierung von p53 und zur Induktion eines Zellzyklusarrests führt und dadurch die Differenzierungskontrolle mit Tumorsuppressor-Signalwegen verknüpft.
• Das Protein bindet DNA und beeinflusst die Expression mehrerer Gene, was auf eine Funktion als Transkriptionsfaktor im Zellkern hindeutet.
• MLF1 ist im Zytoplasma, Zellkern, Zilien der Zellfortsätze und im Zytoskelett (basaler Zilienkörper) lokalisiert, was auf einen dynamischen Transport zwischen verschiedenen Zellkompartimenten und eine Beteiligung an unterschiedlichen zellulären Bereichen hinweist.
• Die Gewebeexpression ist in Hoden, Eierstock, Skelettmuskel, Herz, Niere und Kolon am höchsten, während in Milz, Thymus und peripheren Blutleukozyten niedrige Spiegel vorliegen, was eine breite, aber regulierte Gewebeverteilung widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Phosphorylierung, und das Protein enthält Bereiche mit alternativem Spleißen, die zur funktionellen Vielfalt beitragen. Es wird als Entwicklungsprotein klassifiziert und mit chromosomalen Umlagerungen bei myeloischen malignen Erkrankungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das vollständige humane MLF1 (Aminosäuren 1-268) und liegt als rekombinantes Fusionsprotein vor. Dieses Design kann eine breite Epitoperkennung ermöglichen, die für den Nachweis mehrerer Isoformen und posttranslational modifizierter Formen geeignet ist.
• Bei der Western-Blot-Analyse (WB) wird auf Grundlage des berechneten Molekulargewichts eine Bande bei ungefähr 31 kDa erwartet. Validieren Sie die beobachtete Bandengröße in der relevanten Spezies und dem entsprechenden Probentyp, da posttranslationale Modifikationen oder Isoformvarianten geringfügige Verschiebungen verursachen können.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sind Signale sowohl in zytoplasmatischen als auch in nukleären Kompartimenten sowie je nach Zelltyp und Kulturbedingungen möglicherweise auch an primären Zilien zu erwarten. Eine Ko-Färbung mit Organellenmarkern wird empfohlen.
• Es wurde gezeigt, dass der Antikörper mit Maus und Ratte kreuzreagiert, wodurch vergleichende Studien zwischen diesen Spezies ermöglicht werden. Bestätigen Sie dennoch die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System, insbesondere bei der Verwendung genetisch veränderter Modelle.
• Für ELISA sollte bei der Entwicklung eines Sandwich-Assays die Kombination mit einem passenden Detektionsantikörper in Betracht gezogen werden; optimale Beschichtungs- und Detektionsbedingungen sollten empirisch bestimmt werden.

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