Monoklonaler Anti-MIPEP-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q99797

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der mitochondrialen Zwischenpeptidase (MIPEP)

• MIPEP, auch als MIP, HMIP und COXPD31 bekannt, ist eine mitochondriale Zwischenpeptidase, die nach dem Import kernkodierte mitochondriale Vorläuferproteine verarbeitet.
• Sie befindet sich spezifisch in der mitochondrialen Matrix, wo sie N-terminale Oktapeptide von Zwischenformen der Proteine abspaltet, um deren reife, funktionsfähige Größen zu erzeugen.
• MIPEP ist eine zinkabhängige Metalloprotease, die für ihre katalytische Aktivität zweiwertige Kationen wie Zn²⁺, Mn²⁺ oder Mg²⁺ benötigt.
• Das Protein gehört zur M3-Familie der Metalloendopeptidasen und ist über verschiedene Spezies hinweg hoch konserviert, was seine essenzielle Rolle in der mitochondrialen Proteostase widerspiegelt.
• Mutationen im MIPEP-Gen verursachen den kombinierten Oxidationsphosphorylierungsdefekt 31 (COXPD31), eine schwere mitochondriale Erkrankung mit Multisystembeteiligung.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung können die Aktivität oder Stabilität von MIPEP innerhalb der mitochondrialen Matrix regulieren.
• Als Schlüsselenzym bei der Reifung mitochondrialer Proteine beeinflusst MIPEP den Aufbau der Atmungskette, die ATP-Produktion und den gesamten zellulären Energiestoffwechsel.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 511–713 des humanen MIPEP; der Antikörper kann das vollständige Protein (~81 kDa) erkennen. Überprüfen Sie die Spezifität anhand von mitochrondrienangereicherten Lysaten aus humanen Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293) und ziehen Sie Kontrollen mit siRNA-Knockdown in Betracht.
• Optimieren Sie für den Western Blot die Extraktionspuffer, um mitochondriale Proteine zu erhalten, und verwenden Sie frische oder ordnungsgemäß gelagerte Proben, um einen Abbau zu vermeiden.
• Kombinieren Sie den Antikörper bei IF/ICC mit einem mitochondrialen Marker wie Tom20, um eine eindeutige Lokalisation zu gewährleisten. Die Permeabilisierungsschritte sollten für mitochondriale Membranantigene optimiert werden.
• ELISA-Anwendungen können für natives oder rekombinantes MIPEP geeignet sein; eine empirische Optimierung der Beschichtungs- und Detektionsbedingungen wird jedoch empfohlen.
• Als monoklonaler Kaninchenantikörper bietet er eine konsistente Reproduzierbarkeit zwischen Chargen und eine hohe Affinität und eignet sich daher für anspruchsvolle quantitative Assays.

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