Anti-MGMT Kaninchen Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P16455

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MGMT-Funktion und Lokalisierung

• Der offizielle Proteinname ist Methylated-DNA--protein-cysteine methyltransferase, allgemein bekannt als O-6-Methylguanin-DNA-Methyltransferase (MGMT). Sie wird auch als O-6-Methylguanin-DNA-Alkyltransferase bezeichnet.
• MGMT ist ein Schlüsselenzym der DNA-Reparatur, das den Zellen Schutz vor den mutagenen und zytotoxischen Wirkungen alkylierender Agenzien bietet. Sie entfernt spezifisch Methylgruppen von O6-Methylguanin (O6-MeG) und O4-Methylthymin (O4-MeT) in der DNA.
• Der Reparaturmechanismus ist ein stöchiometrischer Transfer der Methylgruppe von der geschädigten Nukleobase auf einen Cysteinrest im aktiven Zentrum des Enzyms. Dies ist eine Suizidreaktion, da das Enzym nach einem einzigen Umsatz irreversibel inaktiviert wird.
• MGMT ist überwiegend im Zellkern lokalisiert, wo sie auf genomische DNA-Schäden trifft.
• Das Protein bindet ein Zinkion pro Untereinheit, und die Zinkkoordination ist wahrscheinlich wichtig für seine strukturelle Integrität.
• MGMT wird durch Phosphorylierung reguliert, wie durch ihre Klassifizierung als Phosphoprotein angezeigt.
• Mit MGMT assoziierte Schlüsselwörter sind DNA-Schaden, DNA-Reparatur, Methyltransferase, Transferase, Metallbindung und Referenzproteom, was ihre etablierte Rolle bei der Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser monoklonale Kaninchenantikörper wurde gegen ein Peptidantigen erzeugt, das die Aminosäuren 108–207 des humanen MGMT umspannt. Es wird erwartet, dass er im Western Blot unter reduzierenden Bedingungen ein Band bei ~22 kDa detektiert.
• Für die Western-Blot-Analyse sollte die Verwendung einer positiven Kontrolle wie humaner Zelllysate, von denen bekannt ist, dass sie MGMT exprimieren (z. B. HeLa, HEK293), in Betracht gezogen werden. Eine Ladekontrolle sollte parallel durchgeführt werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Indirekte oder Sandwich-ELISA-Formate können optimiert werden; stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen das Epitop angemessen präsentiert.
• Da die MGMT-Expression in humanen Geweben und Zelllinien variieren kann, validieren Sie den Antikörper in Ihrem experimentellen System, um Reaktivität und Spezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper ist für humane Reaktivität validiert; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet, daher kann die Leistung in nicht-humanen Modellen nicht garantiert werden.

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