Anti-MFI2 (Melanotransferrin) Kaninchen-poliklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P08582

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MFI2

• Melanotransferrin (MFI2), auch bekannt als Melanom-assoziiertes Antigen p97 oder CD228, ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein aus der Transferrin-Familie, das pro Unterunit ein Eisenatom binden kann.
• Es vermittelt die zelluläre Eisenaufnahme durch rezeptorvermittelte Endozytose: Das Protein internalisiert gebundenes Eisen und kehrt anschließend zur Zellmembran zurück; es kann möglicherweise auch Zink transportieren.
• Das Protein ist über einen Glykosylphosphatidylinositol (GPI)-Anker an die Zellmembran gebunden; durch alternatives Spleißen entsteht eine sezernierte Isoform, die den Anker fehlt.
• Subzellulär lokalisiert es sich hauptsächlich an der Zellmembran, was mit seiner Funktion beim Metallionentransport über die Plasmamembran übereinstimmt.
• Die Expression ist besonders stark in humanen Melanomen und bestimmten fetalen Geweben; niedrigere Gehalte werden in Leber, Epithel, Nabelschnur, Plazenta und Schweißdrüsenkanälchen nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Phosphorylierung, wie Proteomik- und Strukturstudien belegen.
• Funktionale Schlüsselwörter heben seine Beteiligung am Ionentransport, Eisentransport und an der Metallbindung hervor sowie seine Klassifizierung als Lipoprotein und GPI-verankertes Membranprotein.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für das Western Blotting beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht von Melanotransferrin etwa 80 kDa; erwarten Sie eine spezifische Bande nahe dieser Größe unter reduzierenden Bedingungen und validieren Sie die Detektion mit relevanten Lysaten von Mensch, Maus oder Ratte.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist das Zielprotein an der Zellmembran lokalisiert: Erwägen Sie eine Färbung lebender Zellen ohne Permeabilisierung, um Oberflächenrezeptoren nachzuweisen, oder verwenden Sie eine milde Permeabilisierung für eine Gesamtzellfärbung; optimieren Sie die Fixierung, um die Integrität der Epitope zu erhalten.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (Aminosäuren 20–200), wodurch der Antikörper geeignet ist, den nativen Rezeptor auf lebenden Zellen zu erkennen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz mit rekombinantem Protein oder nativen Standards evaluiert werden; Titrations- und Paarungsexperimente werden empfohlen.
• Obwohl eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte nachgewiesen wurde, überprüfen Sie die endogene Expression in Ihrem spezifischen Modellsystem, da die Gehalte zwischen verschiedenen Geweben variieren können.

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