Anti-MFGE8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q08431

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Lactadherin (MFGE8)

• Lactadherin (MFGE8) ist ein sekretiertes und membranassoziiertes Glykoprotein, das auch als Brustepithelantigen BA46, HMFG, MFGM, SED1 und EDIL1 bekannt ist.
• Es spielt eine kritische Rolle bei der Aufrechterhaltung der intestinalen epithelialen Homöostase und der Förderung der Schleimhautheilung, teilweise durch VEGF-abhängige Neovaskularisierung.
• MFGE8 wirkt als spezifischer Ligand für Integrinrezeptoren alpha-v/beta-3 und alpha-v/beta-5 und bindet auch Phosphatidylserin auf apoptotischen Zellen und erleichtert deren phagozytische Clearance.
• Das Protein ist an der Gameteninteraktion als Zona-pellucida-bindendes Protein beteiligt, was eine Rolle bei der Befruchtung nahelegt.
• Es ist eine Hauptkomponente der amyloiden Substanz der Aortenmedia.
• MFGE8 wird auf der Oberfläche von Brustepithelzellen und in der Aortenmedia exprimiert; es ist in mehreren Karzinomen überexprimiert.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen, Glykosylierung und Phosphorylierung; enthält EGF-ähnliche Domänen und Disulfidbindungen.
• Subzellulär lokalisiert es sich an der Membran, wird sezerniert und findet sich in zytoplasmatischen Vesikeln, einschließlich sekretorischer Vesikel und Akrosommembranen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 1-200 von humanem MFGE8 (NP_005919.2) ab, was die N-terminale Region einschließt; diese Sequenz kann das Signalpeptid und einen Teil des reifen Proteins enthalten. Berücksichtigen Sie die potenzielle Auswirkung auf die Antikörpererkennung von sezernierten im Vergleich zu membrangebundenen Formen.
• Für Western Blot ist das vorhergesagte Molekulargewicht ~43 kDa; aufgrund von Glykosylierung und alternatives Spleißen können jedoch zusätzliche Bänder beobachtet werden. Validieren Sie mit relevanten Zelllysaten oder rekombinanten Proteinkontrollen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) und der Immunhistochemie (IHC-P) beachten Sie, dass MFGE8 an der Zellmembran, in sekretorischen Vesikeln und in zytoplasmatischen Kompartimenten lokalisiert ist; fügen Sie geeignete Permeabilisierungs- und Fixierungsprotokolle für die Detektion hinzu.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Mensch, Maus und Ratte; eignet sich daher für Studien in diesen Spezies, eine Validierung in jeder Spezies/jedem Modell wird jedoch empfohlen.
• Angesichts seiner Rolle bei Apoptose und Angiogenese sollten Sie erwägen, den Antikörper in funktionellen Assays wie Phagozytose- oder Tubulogenese-Assays in Kombination mit geeigneten Kontrollen zu verwenden.

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