Anti-MFG-E8 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q08431

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: MFG-E8-Funktion und -Lokalisierung

• Laktadherin (MFG-E8) ist ein 43 kDa Glykoprotein, das durch das MFGE8-Gen kodiert wird; alternatives Spleißen kann mehrere Isoformen erzeugen, doch die Hauptform enthält konsistent EGF-ähnliche und Discoidin-ähnliche F5/8-Typ-C-Domänen.
• Es fördert die Homöostase des intestinalen Epithels und die Heilung der Schleimhaut und unterstützt zudem die VEGF-abhängige Neovaskularisation (Angiogenese).
• MFG-E8 fungiert als wichtiges Brückenmolekül für die phagozytische Clearance apoptotischer Zellen: Es bindet an Phosphatidylserin auf sterbenden Zellen und engagiert die Integrine αvβ3 und αvβ5 auf Phagozyten.
• Das Protein kann direkt an phosphatidylserinreiche Membranen auf rezeptorunabhängige Weise binden und interagiert mit der Zona pellucida, was auf eine Rolle bei der Spermium-Ei-Bindung hindeutet.
• Es ist eine Hauptkomponente von amyloiden Ablagerungen in der Media der Aorta, was es mit pathologischen vaskulären Ablagerungen in Verbindung bringt.
• Subzellulär wird MFG-E8 auf der Zellmembran gefunden, in den extrazellulären Raum sezerniert sowie innerhalb zytoplasmatischer/sekretorischer Vesikel und der Akrosommembran.
• Die Gewebsspezifität umfasst mammary epitheliale Zellen, die Aortenmedia und eine Überexpression in mehreren Karzinomen; es ist auch in Milchfettglobulinen vorhanden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbrücken, Glykosylierung und Phosphorylierung; das Protein ist unter Schlüsselwörtern wie Amyloid, Angiogenese, Zelladhäsion, Befruchtung und sekretorisches Referenzproteom klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die C-terminale Domäne (Aminosäuren 231–387) von humanem MFG-E8, was erwartet, dass Antikörper erzeugt werden, die das全长 ~43 kDa Protein im Western Blot erkennen; erwägen Sie das Laden von 20–30 µg reduziertem Lysat.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte eignet sich der Antikörper für multispzies-Studien; validieren Sie stets die Expressionsniveaus im gewählten ProbenSystem.
• Für IF/ICC wird eine Permeabilisierung empfohlen, da MFG-E8 an Membranen und Vesikeln lokalisiert ist; optimieren Sie Fixierung und Antikörperverdünnung, um den Hintergrund zu minimieren.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; die Kombination mit einem zweiten Antikörper, der ein anderes Epitop erkennt, kann die Empfindlichkeit verbessern.

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