Anti-METTL3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86U44

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: METTL3-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: N(6)-Adenosin-Methyltransferase-katalytische Untereinheit METTL3, auch als Methyltransferase-ähnliches Protein 3 (hMETTL3) oder MT-A70 bezeichnet, ist die katalytische Komponente des METTL3-METTL14 RNA-N6-Methyltransferase-Komplexes.

• Kernfunktion der N6-Methyltransferase: Das METTL3-METTL14-Heterodimer katalysiert die Bildung von N6-Methyladenosin (m6A) an RNA, bevorzugt an 5'-[AG]GAC-3'-Konsensusmotiven. Die m6A-Modifikation reguliert die mRNA-Stabilität, -verarbeitung, -translationseffizienz und -bearbeitung und beeinflusst diverse biologische Prozesse. Verwandte Referenzen: PMID:22575960 | PMID:24284625 | PMID:25719671 | PMID:27281194 | PMID:27373337 | PMID:27627798

• Biologische Rollen: Die von METTL3 vermittelte m6A-Methylierung ist an der Regulation der zirkadianen Uhr, der Differenzierung von embryonalen und hämatopoetischen Stammzellen, der kortikalen Neurogenese, der T-Zell-Homöostase, der Spermatogenese, der Oogenese und der Reaktion auf DNA-Schäden beteiligt.

• Subzelluläre Lokalisierung: Überwiegend nukleär mit Anreicherung in nukleären Speckles; auch im Zytoplasma nachgewiesen, was konsistent mit seinen Funktionen bei der nukleären RNA-Modifikation und der Förderung der zytoplasmatischen Translation ist.

• Gewebsspezifität: Ubiquitär auf niedrigem Niveau exprimiert; besonders nachweisbar in Milz, Thymus, Prostata, Hoden, Eierstock, Dünndarm, Dickdarm und peripheren Blutzellen.

• Posttranslationale Modifikationen und Schlüsselwörter: Acetyliert, phosphoryliert und Gegenstand der Ubiquitin-Konjugation. Besitzt RNA-bindende und S-Adenosyl-L-Methionin-bindende Domänen mit einem Molekulargewicht von 64.474 Da.

• Krebsrelevanz: Eine Überexpression wird in mehreren Krebsarten beobachtet und fördert die Zellproliferation teilweise durch eine methyltransferase-unabhängige Verstärkung der mRNA-Translation. Verwandte Referenzen: PMID:27117702

• Zusätzliche Substrate: Methyliert primäre miRNAs (pri-miRNAs), um die Erkennung und Verarbeitung durch DGCR8 zu erleichtern, und modifiziert SARS-CoV-2-RNA, um die RIG-I-abhängige angeborene Immunwahrnehmung abzuschwächen. Verwandte Referenzen: PMID:25799998 | PMID:33961823

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immundesign: Das Immunogen entspricht den N-terminalen Aminosäuren 1-156 von menschlichem METTL3, was zwischen Mensch, Maus und Ratte gut konserviert ist und die Ansprüche auf die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Western Blot (WB): Verwenden Sie Ganzell- oder Kernlysate; eine Bande in der Nähe von 64 kDa wird erwartet. Validieren Sie die Antikörperleistung in Ihrem spezifischen Probensystem, da posttranslationale Modifikationen oder Isoformvarianten die Mobilität beeinflussen können.
• Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC): Eine Antigenretrieval kann für Paraffinschnitte erforderlich sein. Die Kern- und Kernspeckle-Färbung sollte überwiegen; zytoplasmatische Signale können je nach Zelltyp und Fixierungsbedingungen ebenfalls beobachtet werden.
• ELISA: Der Antikörper kann als Nachweisreagenz gegen rekombinantes METTL3 oder Peptidantigene verwendet werden; die Paarung mit einem METTL3-Fangantikörper kann für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA untersucht werden.
• Kreuzreaktivität: Es wurde berichtet, dass der Antikörper menschliches, murines und rattes METTL3 erkennt; eine Überprüfung mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen wird für jede Spezies empfohlen.

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