Anti-METTL3-Kaninchen-monoklonaler Antikörper [KD-validiert] für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA – Q86U44

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von METTL3

• METTL3 (katalytische Untereinheit der N(6)-Adenosin-Methyltransferase) ist ein 64-kDa-Protein, das in nukleären Speckles und im Zytoplasma lokalisiert ist. Es bildet mit METTL14 einen heterodimeren Komplex, der den katalytischen Kern für das Anbringen von m6A-Modifikationen an RNA bildet.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:27281194
  PMID:27373337
  PMID:27627798
• METTL3 bringt m6A an der Konsensussequenz 5′-[AG]GAC-3′ auf mRNA an und reguliert dadurch die Transkriptstabilität, -verarbeitung, Translationseffizienz und -editierung.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22575960
  PMID:24284625
  PMID:25719671
• Das m6A-Signal fördert die Destabilisierung und den Abbau von mRNA, sobald mRNAs in das Nukleoplasma freigesetzt werden, und ermöglicht dadurch eine dynamische Kontrolle der Genexpression.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:28637692
• In embryonalen Stammzellen treibt die METTL3-vermittelte m6A-Methylierung von Transkripten, die mit der Pluripotenz assoziiert sind, deren Abbau voran und erleichtert dadurch den Austritt aus dem naiven Zustand sowie die Differenzierung.
• METTL3 trägt zur Regulation der zirkadianen Uhr bei, indem es die nukleäre Verarbeitung von mRNAs der Uhrgene beschleunigt und den hepatischen Lipidstoffwechsel moduliert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:30428350
• Nach UV-induzierten DNA-Schäden wird METTL3 rasch an die Schadensstellen rekrutiert, wo es m6A an Poly(A)-Transkripten katalysiert und dadurch die Rekrutierung der DNA-Polymerase κ (POLK) fördert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:28297716
• Im Zytoplasma interagiert METTL3 mit Initiationsfaktoren der Translation, um die mRNA-Translation unabhängig von seiner Methyltransferaseaktivität zu steigern; diese Funktion steht mit der Proliferation von Krebszellen in Zusammenhang.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:27117702
• Während einer SARS-CoV-2-Infektion fügt METTL3 viraler RNA m6A-Modifikationen hinzu, wodurch die Bindung von RIG-I reduziert und somit die angeborene Immunerkennung abgeschwächt wird.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:33961823

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–156) des humanen METTL3. Berücksichtigen Sie bei der Verwendung dieses Antikörpers, dass er möglicherweise Epitope innerhalb dieses Fragments erkennt; validieren Sie die Bindung an das vollständige METTL3 sowie an potenzielle Isoformen in Ihrem Probensystem.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 64 kDa. Optimieren Sie den Gelprozentsatz (z. B. 10 % SDS-PAGE) und die Transferbedingungen für Proteine mittlerer Größe. Verwenden Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen.
• Die angegebene Eignung für ChIP deutet darauf hin, dass der Antikörper METTL3-RNA- oder Chromatinkomplexe immunpräzipitieren kann; passen Sie die Bedingungen für die Vernetzung, Sonikation und Waschstringenz an Ihr spezifisches Protokoll an.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sollten die Bedingungen für Fixierung und Permeabilisierung optimiert werden, um das Epitop zu erhalten und gleichzeitig den Zugang des Antikörpers zu ermöglichen.
• Es sind mehrere Anwendungen aufgeführt. Dennoch sollte jedes Labor die Leistung des Antikörpers unter seinen eigenen experimentellen Bedingungen bestimmen und optimieren.

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