Anti-METTL14 Monoklonaler Antikörper (KD-validiert) für WB, IHC-P, IP, ELISA – Q9HCE5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von METTL14

• METTL14 (Methyltransferase-ähnliches Protein 14, auch bekannt als hMETTL14) ist die nicht-katalytische Untereinheit des N6-Adenosin-Methyltransferase-Komplexes.
• Im Heterodimer mit METTL3 dient METTL14 als RNA-bindendes Gerüst, das die mRNA-Substrate erkennt, während METTL3 die katalytische Aktivität bereitstellt (PubMed:27281194, PubMed:27373337, PubMed:27627798). Zugehörige Referenzen: PMID:27281194, PMID:27373337, PMID:27627798
• Der Komplex katalysiert die N6-Methyladenosin (m6A)-Modifikation an Adeninresten innerhalb des Konsensusmotivs 5'-[AG]GAC-3' und reguliert dadurch die Stabilität und Prozessierung von mRNA (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Zugehörige Referenzen: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• Die m6A-Methylierung fungiert als zentraler Regulator der mRNA-Stabilität, indem sie die Destabilisierung und den Abbau von Transkripten fördert und die Dynamik der Genexpression beeinflusst.
• Die durch METTL14 vermittelte m6A-Methylierung ist entscheidend für die Regulation der circadianen Uhr, die Differenzierung embryonaler Stammzellen und die kortikale Neurogenese (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Zugehörige Referenzen: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• Das Protein ist überwiegend im Zellkern lokalisiert.
• METTL14 ist außerdem an der Spermatogenese und der männlichen Fruchtbarkeit beteiligt und reguliert die Differenzierung von Spermatogonien sowie die Meiose (Nach Ähnlichkeit).
• METTL14 ist ein Phosphoprotein, das in proteomischen Analysen identifiziert wurde, mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von 52.150 Da.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-210 von humanem METTL14 (NP_066012.1) umfasst. Da diese Region am N-Terminus liegt, sollten Sie deren Konservierung zwischen Spezies berücksichtigen, wenn eine Kreuzreaktivität gewünscht ist; eine Sequenzausrichtung kann bei der Vorhersage der Reaktivität in weiteren Spezies helfen.
• Für Western Blot (WB) ist eine einzelne Bande bei etwa 52 kDa zu erwarten. Validieren Sie die Detektion in Gewebe-/Zelllysaten der entsprechenden Spezies, einschließlich Mensch, Maus und Ratte.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) zeigt METTL14 eine Kernfärbung. Optimieren Sie die Bedingungen zur Antigenrettung und verwenden Sie nach Möglichkeit bekannte positive Gewebe (z. B. Gehirn, Hoden) als Kontrollen.
• Für die Immunpräzipitation (IP) kann dieser monoklonale Antikörper aus Kaninchen METTL14-Komplexe effizient einfangen; schließen Sie geeignete Isotypkontrollen ein und bestätigen Sie die Co-Immunpräzipitation von METTL3, wenn Sie das Methyltransferase-Heterodimer untersuchen.
• ELISA: Der Antikörper kann als Fang- oder Detektionsantikörper verwendet werden, wenn er mit einem kompatiblen Sekundärantikörper zur Quantifizierung von METTL14 kombiniert wird; validieren Sie den dynamischen Bereich und die Spezifität des Assays.

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