Anti-MET Kaninchen-Polyclonales Antikörper für WB und ELISA - P08581

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Hepatozyten-Wachstumsfaktor-Rezeptors (MET)

• MET (c-Met, HGFR) ist eine transmembranäre Rezeptor-Tyrosinkinase, die spezifisch Hepatozyten-Wachstumsfaktor (HGF) bindet und pleiotrope zelluläre Antworten auslöst, darunter Proliferation, Motilität (Streuung), Morphogenese und Überleben.
• Nach HGF-induzierter Dimerisierung autophosphoryliert MET zytoplasmatische Tyrosinreste und erzeugt so Bindungsstellen für Adaptorproteine wie GRB2, GAB1 und SRC. Diese aktivieren wiederum die RAS/ERK-, PI3K/AKT- und PLCγ/PKC-Signalkaskaden, um die Umorganisation des Zytoskeletts und transkriptionelle Programme voranzutreiben.
• MET-Signalgebung ist während der Embryogenese (Gastrulation, Myoblastenwanderung, Leber- und Nierenentwicklung) und bei postnatalen Prozessen wie Wundheilung, Organregeneration und Knochenhomöostase unerlässlich.
• Der reife MET-Rezeptor ist ein Heterodimer, das aus einer extrazellulären α-Kette und einer durchgangigen transmembranären β-Kette mit der Tyrosinkinasedomäne besteht; er ist hauptsächlich an der Plasmamembran lokalisiert, durch Ektodomänen-Ablösung kann eine lösliche Form entstehen.
• Beim Menschen wird MET weithin in Epithelzellen der Leber, des Gastrointestinaltrakts, der Schilddrüse, der Niere und der Haut exprimiert, mit besonders hohen Gehalten in Hepatozyten, Magen- und Darmepithel sowie basalen Keratinozyten; auf Proteinebene kommt es auch im Gehirn und im metaphysären Knochen vor.
• Als Eintrittsrezeptor für Listeria monocytogenes über seine Interaktion mit dem Internalin InlB veranschaulicht MET einen pathophysiologischen Mechanismus mikrobieller Invasion. Seine aberrante Aktivierung (durch Mutationen, Genamplifikation oder Überexpression) ist an der onkogenen Transformation beteiligt, was ihn zu einem bedeutenden therapeutischen Ziel macht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der zytoplasmatischen Region (Aminosäuren 960–1161) des menschlichen MET, die Sequenzen der Kinasedomäne enthält; diese Region ist zwischen Mensch und Ratte hochkonserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für die Western Blot-Analyse können Lysate von Zelllinien verwendet werden, die bekanntermaßen MET exprimieren (z. B. A549, HeLa oder Hepatozytenlinien) oder Gewebeproben (Leber, Niere); erwarten Sie Banden um 156 kDa, eventuell begleitet von zusätzlichen Banden, die glykosylierte oder gespaltene Formen repräsentieren.
• Bei der Durchführung von ELISA können Sie den Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz in einem Sandwich-Format mit einem gepaarten monoklonalen Antikörper verwenden; eine Optimierung der Beschichtungskonzentration und der Nachweisbedingungen wird empfohlen.
• Da MET ein transmembranärer Rezeptor ist, können angereicherte Membranpräparationen oder Immunpräzipitation das Signal bei WB verbessern; Lysepuffer mit nicht denaturierenden Detergenzien (z. B. 1 % Triton X-100) werden empfohlen, um die Epitope zu erhalten.

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